[发明专利]一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种苦杏仁的UPLC‑Q‑TOF‑MS指纹图谱检测方法，包括如下步骤：1)制备供试品溶液；2)采集供试品溶液的UPLC‑Q‑TOF‑MS基峰离子流谱图；3)将2)中谱图导入到中药色谱指纹图谱相似度评价系统并确定共有峰；4)以中位数法生成对照指纹图谱；5)计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，并进行相似度评价。本发明建立的苦杏仁指纹图谱，确定了25个共有峰，并对部分共有峰进行了鉴定；通过大量的色谱和质谱信息及相似度评价，有利于对苦杏仁药材质量进行综合全面评价，保障其功效成分种类和含量的均一稳定性，实现苦杏仁药材质量的有效监督和管控目的。

技术领域

本发明涉及中药材质量鉴别和评价技术领域，尤其是涉及一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法。

背景技术

苦杏仁为蔷薇科植物山杏Prunus armeniaca L.var.ansu Maxim.、西伯利亚杏Prunus sibirica L.、东北杏Prunus mandshurica(Maxim.)Koehne或杏Prunus armeniacaL.的干燥成熟种子，味苦，性微温，有小毒，归肺、大肠经，具有降气止咳平喘，润肠通便的功效。自新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019，COVID-19)爆发以来，苦杏仁被广泛应用于COVID-19治疗中，多次出现在《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第八版)》中医辨证治疗处方中。苦杏仁在我国资源丰富，南北各地均有出产，分布区域广。中药材的生长发育与外界环境条件有着密切的关系，不同产地苦杏仁受各地生态环境以及培育方式的影响，其药材质量也存在着较大差异。因此，对苦杏仁原料药进行鉴别和评价意义重大，其品种的差异、质量的优劣直接影响到临床用药的安全有效性。

目前，不同产地苦杏仁的评价和鉴别所依据的技术方法主要有性状鉴别法、薄层色谱技术和液相色谱指纹图谱技术。性状鉴别主要是观察药材形状、大小、色泽、表面、质地、断面、气、味等特征，该方法简单易行，但需要有经验人员进行操作和判断，主观性较强；薄层色谱技术主要是通过薄层色谱斑点的有无进行药品真伪的判断，通过斑点的大小及颜色进行药品品质的分析，该方法所用设备简单、快速、药材用量少，但对操作人员的操作水平和熟练程度有较高的要求；液相色谱指纹图谱技术能够通过标示中药材特征的共有峰图谱，借以辨别真伪、评价药材的均一性和稳定性，但尚无法实现更为完整全面的质量评价及鉴别。

UPLC-Q-TOF-MS技术将具有高分离度、高灵敏度的液相色谱系统与能同时提供母离子和碎片离子精确质量数以及元素组成的高通量高分辨质谱有机结合，可快速建立指纹图谱，并能直观综合地应用于中药材的质量评价。因此，建立苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱，对保障苦杏仁药材质量的稳定有效性具有重要的意义。

发明内容

本发明提供一种苦杏仁的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱检测方法，包括以下步骤：

a)制备供试品溶液

称取适量粉碎样品，甲醇溶液溶解，超声提取，取上清液经微孔滤膜过滤，制得供试品溶液；

b)采集供试品溶液的UPLC-Q-TOF-MS基峰离子流谱图

样品溶液经超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测，采集基峰离子流谱图；

c)将b)中谱图导入到中药色谱指纹图谱相似度评价系统并确定共有峰

将不同产地17批次苦杏仁谱图以cdf格式导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行分析，设定时间窗宽度为0.2min，对17批次苦杏仁谱图进行多点校正后自动峰匹配，共确定25个共有峰；

d)以中位数法生成对照指纹图谱；

e)计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，并进行相似度评价。