[发明专利]一种产β-甘露聚糖酶的菌株及其应用有效

专利信息
申请号: 202111106429.5 申请日: 2021-09-22
公开(公告)号: CN113801815B 公开(公告)日: 2023-05-23
发明(设计)人: 王佰涛;刘德海;杨文玲;雷高;李珊珊;权淑静;李亮亮;甄静;王继雯;陈国参;丁芳 申请(专利权)人: 河南省科学院生物研究所有限责任公司;河南省科学院
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/42;C12P19/14;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;C12R1/07
代理公司: 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 代理人: 聂孟民
地址: 450003*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 甘露 聚糖 菌株 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种产β-甘露聚糖酶的沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)菌株WBT0011,分类命名为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号CGMCC No.22575,保藏日期2021年5月20号,保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.权利要求1所述的产β-甘露聚糖酶的菌株WBT0011在制备β-甘露聚糖酶中的应用,其特征在于,制备β-甘露聚糖酶的方法包括以下步骤:

(1)菌种活化:将冻存保藏菌株WBT0011,接种于活化培养基中,37℃、180r/min培养24h;所述活化培养基为:蛋白胨10g、酵母粉5g、氯化钠5g、pH7.4,加蒸馏水至1000mL,121℃灭菌25分钟,冷却备用;

(2)种子培养:将上述活化菌种按照接种量1%接种于种子培养基中,37℃、180r/min培养24h;所述种子培养基为:蛋白胨10g、牛肉粉3g、氯化钠5g、pH7.3,加蒸馏水至1000mL,121℃灭菌25分钟,冷却备用;

(3)发酵培养:将上述种子液按照接种量2%接种于β-甘露聚糖酶产酶培养基中,37℃、180r/min培养48h得到发酵酶液,而后在4℃、12000r/min条件离心10min,得到上清液即为β-甘露聚糖酶,酶活测定:

在37℃、pH5.5条件下,每分钟从浓度为3mg/mL的甘露聚糖溶液中释放1μmol还原糖所需要的酶量为一个β-甘露聚糖酶活力单位(U),计算公式为:

β-甘露聚糖酶活力(U·mL-1)

式中:A表示酶液的吸光度,A0表示空白吸光度,K表示标准曲线斜率,b表示标准曲线截距,M表示D-甘露糖的摩尔质量,30表示酶解反应时间,1000表示单位换算系数。

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