[发明专利]一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法

说明书

一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法，具有以下步骤，1)取吡罗昔康，加稀释剂溶解，得到浓度为0.5mg/ml的试样溶液；2)取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释500倍，得到对照溶液；3)采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，设置流动相的流速为0.8‑1.2ml/min，流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为浓度是0.05‑0.5％的酸溶液，流动相B为甲醇和乙腈按照体积比为1：1的混合物，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱；4)分别向色谱柱进样等体积的试样溶液、对照溶液，进样量为5μl‑100μl，利用210nm至290nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。本发明操作简单、方便，可有效分离测定吡罗昔康及其杂质，有效控制吡罗昔康及其产品的质量。

技术领域

本发明涉及分析领域，特别涉及一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法。

背景技术

吡罗昔康化学名为4-羟基-2-甲基-N-2-吡啶基-2H-1或2-苯并噻嗪-3-羧酰胺1,1-二氧化物，为一非甾体抗炎镇痛药。1982年6月台糖辉瑞公司以Feldene商品名，富山化学工业以Baxo商品名上市，其化学结构如式(a)所示。

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体和未知杂质可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这些已知中间体和未知杂质以及产生的降解产物即为药物质量控制中通常所说的有关物质(即杂质)。对于吡罗昔康的合成主要控制的已知杂质有十三个，分别是：杂质Z1、杂质Z2、杂质Z3、杂质Z4、杂质Z5、杂质Z6、杂质Z7、杂质Z8、杂质Z9、杂质Z10、杂质Z11、杂质Z12、杂质Z13，其结构式分别如式(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)。

可见，吡罗昔康的杂质较多，且结构类似，给分离带来难度。另外，各杂质的极性各不相同，在满足吡罗昔康与各个杂质分离的前提下，还要满足杂质与杂质之间的分离，增大了检测难度。采用常规的检测手段方法难以实现吡罗昔康与杂质以及杂质与杂质之间的有效分离，不利于吡罗昔康的质量控制。

为了准确地控制吡罗昔康产品的质量，有必要研究一种能简单、快速、准确地分离检测出吡罗昔康有关物质的方法。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法，其操作简单、方便，可有效分离测定吡罗昔康及其杂质，有效控制吡罗昔康及其产品的质量。

本发明的技术方案是：一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法，具有以下步骤，

1)制备试样溶液

取吡罗昔康或含有吡罗昔康的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.5mg/ml的试样溶液；

2)制备对照溶液

取步骤1)得到的试样溶液，加稀释剂稀释500倍，得到对照溶液；

3)采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，设置流动相的流速为0.8-1.2ml/min，所述流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为浓度是0.05-0.5％的酸溶液，流动相B为甲醇和乙腈按照体积比为1：1的混合物，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟至5分钟，流动相A的体积百分数为75％-85％，流动相B的体积百分数为15％-25％；5分钟至25分钟，流动相A的体积百分数线性减少至5％-15％，流动相B的体积百分数线性增加至85％-95％；25分钟至26分钟，流动相A的体积百分数为75％-85％，流动相B的体积百分数为15％-25％；26分钟至35分钟，流动相A的体积百分数为75％-85％，流动相B的体积百分数为15％-25％；

4)分别向色谱柱进样等体积的步骤1)的试样溶液、步骤2)对照溶液，进样量为5μl-100μl，利用210nm至290nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。