[发明专利]NMN的制备方法及含NMN的犬猫抗衰老保健品配方

权利要求书

1.一种NMN的制备方法，其特征在于：步骤如下：

1）微生物培养

含NMN短双岐杆菌培养基条件为：MRS培养，进行催化NMN的表达；所述的MRS含1%蛋白胨，2%葡萄糖，0.1%吐温80，0.2%K₂HPO₄，0.5%乙酸钠，0.2% 氢二铵，0.02%MgSO₄·7H₂O，0.005% MnSO₄·4H₂O，0.1%微量金属溶解液和0.0076%的尿嘧啶，外源添加催化酶烟酰胺磷酸核糖转移酶（nicotinamide phosphoribosyltransferase）；

2）NMN培养滤液获取

含NMN的短双岐杆菌用转速2200g进行离心，分别收集每管细胞的上清液，将细胞进重悬浮，再利用超声细胞破碎器在冰浴上进行超声裂解，每次30秒，循环3次，超声进一步裂解之后再行超滤最终得到NMN料液；

3）NMN料液萃取

将含NMN料液与相同体积的质量百分比浓度4% 的NaHCO₃混合，用于Bond Elut PBA树脂固相萃取；萃取液用3ml 2%的NaHCO₃洗涤后，再用3ml 2%的甲酸进行洗脱，得到β-NMN萃取液；

4）NMN原料制备

用离子交换法进行对NMN萃取液进行除盐处理，然后用醇提水沉法进行脱色处理，脱完色后用蒸发溶剂法进行NMN液体的结晶，结晶样品加水溶解，用转速2200g进行离心过滤，最后对样品进行干燥后得到NMN原料。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的短双歧杆菌的编号为bifidobacterium breve K，双歧杆菌属，先准备短双岐杆菌感受态细胞，然后导入含有NMN活性序列的质粒到感受态的短双岐杆菌得到NMN短双岐杆菌。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述的烟酰胺磷酸核糖转移酶为外源酶，添加量8g/L。

4.一种含NMN的犬猫抗衰老保健品配方，其特征在于：按质量份，包括60-85份鱼油、1-10份β-NMN、0.05-0.2份白藜芦醇、5-20份牛磺酸和1-15份卵磷脂；所述的β-NMN根据权利要求1所述的制备方法制备得到。

5.根据权利要求4所述的含NMN的犬猫抗衰老保健品配方，其特征在于：包括冻干、粉剂、胶囊或者液体的形态。