[发明专利]一种同时检测添加剂、L-肉碱和D-肉碱的方法

权利要求书

1.一种能够同时检测L-肉碱和D-肉碱的高效液相色谱法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、制备标准试剂，并采用高效液相色谱仪按照以下色谱条件进行检测分析，建立回归方程；

所述标准试剂包括L-肉碱、D-肉碱的标准溶液；

所述色谱条件如下：色谱柱为手性色谱柱；紫外检测器波长220 nm；色谱柱：ChiralCD-Ph S5 4.6 mm i.d.×250 mm；流动相为乙腈-高氯酸钠溶液，乙腈: 0.25mol/L NaClO₄溶液=20:80，v/v；等度洗脱；柱温25摄氏度，流速0.5mL/min；进样量：10 μl；

流动相pH=2-4；

S2、样品前处理及检测：称取饲料添加剂样品或预混料，加入超纯水超声提取5-30min，取出冷却至室温，用超纯水定容至刻度，经0.22 µm水相滤膜过滤，上机检测，色谱条件同S1；

S3、将S2检测得到的结果带入S1建立的回归方程，计算得到L-肉碱和D-肉碱浓度。

2.根据权利要求1所述的能够同时检测L-肉碱和D-肉碱的高效液相色谱法，其特征在于，所述L-肉碱标准溶液包括：5.0、10.0、20.0、50.0、100.0µg/mL的标准工作溶液。

3.根据权利要求1所述的能够同时检测L-肉碱和D-肉碱的高效液相色谱法，其特征在于，先配制浓度为1000µg/mL的标准储备液，然后稀释得到标准工作溶液。

4.根据权利要求3所述的能够同时检测L-肉碱和D-肉碱的高效液相色谱法，其特征在于，所述标准储备液是L-肉碱用甲醇溶解得到的。

5.根据权利要求1所述的能够同时检测L-肉碱和D-肉碱的高效液相色谱法，其特征在于，S2样品前处理及检测具体为：称取0.05g饲料添加剂样品或者预混料称2.0g，精确到0.0001g；置于100 mL容量瓶中，加40-80mL超纯水超声提取12-30min，冷却至室温，用超纯水定容至刻度，经0.22 µm水相滤膜过滤，上机检测。