[发明专利]活性海星肽的分离纯化方法、活性海星肽及应用

权利要求书

1.活性海星肽在制备抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖药物或制备抗乳腺癌药物中的应用，其特征在于，所述活性海星肽的分离纯化方法，包括以下步骤：

（1）提供海星经仿生酶解得到的海星肽粗品；其中，海星仿生酶解所用的酶为复合酶，该复合酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶按活力单位比为3:3:4的混合物；

（2）将海星肽粗品采用凝胶色谱柱层析的方法进行纯化，包括：

（a）将海星肽粗品和纯水混合后，分离，得到海星肽样品；

（b）将已溶胀好的层析填料装柱，采用流动相进行压柱，至柱均匀性达到要求；

（c）将海星肽样品进样，洗脱，收集洗脱液，并于280nm下测量紫外吸光度，收集海星肽样品峰；

（d）将洗脱液进行干燥，得到活性海星肽，所述活性海星肽的分子量范围在1100-1700Da之间。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（a）中，分离所采用的过滤膜孔径为0.45μm。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（b）中，层析填料包括Superdex 30，柱体积为60mL。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（b）中，流动相为双蒸水。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤（c）中，洗脱采用蒸馏水进行等度洗脱，洗脱1.5个柱体积。

6.根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征在于，步骤（d）中，所述干燥为真空冷冻干燥。