[发明专利]一种测定多联多价结合疫苗中多糖的含量的方法

说明书

本申请公开了一种测定多联多价结合疫苗中多糖的含量的方法。所述方法可以包括以下步骤：透析预设量多联多价结合疫苗以获取透析液；利用第一测定法确定所述透析液中的第一多糖的第一含量；基于所述第一多糖的第一含量确定所述透析液中的第一O‑乙酰基含量；利用O‑乙酰基测定法确定所述透析液中的第二O‑乙酰基含量；基于所述第一O‑乙酰基含量以及所述第二O‑乙酰基含量确定第三O‑乙酰基含量；基于所述第三O‑乙酰基含量确定所述透析液中的第二多糖的第二含量。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，特别涉及一种测定多联多价结合疫苗中多糖的含量的方法。

背景技术

生物制品(例如，病毒疫苗)在制备完成后，需要根据规定进行成品检定。检定结果符合要求后这些生物制品才可以投放市场。对于多联多价结合疫苗而言，有一项检定是多糖含量的检定。

发明内容

本申请的目的在于提供一种测定多联多价结合疫苗中多糖的含量的方法中糖的含量的方法，以准确的测定多联多价结合疫苗中各种存在形式的糖。

本申请一方面提供了一种测定多联多价结合疫苗中多糖的含量的方法。所述方法包括：透析预设量多联多价结合疫苗以获取透析液；利用第一测定法确定所述透析液中的第一多糖的第一含量；基于所述第一多糖的第一含量确定所述透析液中的第一O-乙酰基含量；利用O-乙酰基测定法确定所述透析液中的第二O-乙酰基含量；基于所述第一O-乙酰基含量以及所述第二O-乙酰基含量确定第三O-乙酰基含量；基于所述第三O-乙酰基含量确定所述透析液中的第二多糖的第二含量。

在一些实施例中，所述多联多价结合疫苗包括A群C群脑膜炎球菌b型流感嗜血杆菌多糖联合疫苗，所述第二多糖包括A群多糖，所述第二含量包括A群多糖含量；所述确定第二多糖的第二含量包括：获取第一预设比例；基于所述第一预设比例以及所述第三O-乙酰基含量，确定所述A群多糖的A群多糖含量。

在一些实施例中，所述第三O-乙酰基含量为所述第一O-乙酰基含量与所述第二O-乙酰基含量之间的差值。

在一些实施例中，所述第一多糖包括C群多糖，所述第一含量包括C群多糖含量，所述第一测定法包括唾液酸含量测定法。

在一些实施例中，所述基于所述第一多糖的第一含量确定所述预设量多联多价结合疫苗中的第一O-乙酰基含量包括：获取第二预设比例；基于所述第二预设比例以及所述第一多糖含量，确定所述第一O-乙酰基含量。

在一些实施例中，所述A群C群脑膜炎球菌b型流感嗜血杆菌多糖联合疫苗进一步包括b型流感嗜血杆菌多糖，所述方法进一步包括：利用第二测定法确定所述透析液中的b型流感嗜血杆菌多糖的多糖含量，所述第二测定法包括核糖法。

在一些实施例中，所述多联多价结合疫苗包括A群C群脑膜炎球菌b型流感嗜血杆菌多糖联合疫苗，所述第二多糖包括A群游离多糖，所述第二含量包括A群游离多糖含量；所述确定第二多糖的第二含量包括：获取所述透析液中的第四O-乙酰基含量；获取A群多糖回收率；至少基于所述A群多糖回收率、所述第三O-乙酰基含量以及所述第四O-乙酰基含量，确定所述A群游离多糖的含量。

在一些实施例中，所述第一多糖包括C群游离多糖，所述第一含量包括C群游离多糖含量；所述获取第四O-乙酰基含量包括：取一部分所述透析液进行苯酚制样，获取上清液；获取C群多糖回收率并至少基于所述C群多糖回收率利用第一测定法确定所述上清液中的C群游离多糖含量，所述第一测定法至少包括唾液酸含量测定法；基于所述C群游离多糖含量确定第五O-乙酰基含量；利用O-乙酰基测定法确定所述上清液中的第六O-乙酰基含量；基于所述第五O-乙酰基含量以及所述第六O-乙酰基含量确定所述第四O-乙酰基含量。

在一些实施例中，所述第四O-乙酰基含量为所述第五O-乙酰基含量与所述第六O-乙酰基含量之间的差值。