[发明专利]一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法

说明书

本发明涉及一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法，属于化学分析技术领域。所述方法采用衍生化反应，色谱柱为Waters Atlantis T3色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，其中，流动相A为甲酸水溶液水溶液，流动相B为甲酸乙腈溶液，再经过色谱条件的优化，包括柱温、流速、波长，流动相和色谱柱的优化之后，本发明的技术方案中HPLC的纯度分析方法，步骤简单，操作简便，方法的准确度高、重复性好、灵敏度高。

技术领域

本发明涉及化学分析领域，具体涉及一种聚乙二醇修饰剂的制备及纯度测定方法。

背景技术

聚乙二醇具有非常好的水溶解性和生物相容性，是经美国FDA批准的极少数能用于人体注射的聚合物之一，它可以改善药物的代谢动力学特性，普遍延长药物在人体内的半衰期，在生物医药领域备受青睐和广泛应用。PEG的工业化生产是以环氧乙烷聚合反应为基础，所以难免会随之产生一些PEG同系物杂质。在利用这种多分散PEG对药物分子进行修饰时，相应获得的产物也是一系列的混合物，这就直接导致药物在分离纯化、结构表征、质量控制和临床应用等多方面存在缺陷，进而影响药物的疗效。

3，6，9三噁十一(碳)烷二酸是一种聚乙二醇修饰剂，CAS：13887-98-4，其分子结构式如下所示：

3，6，9三噁十一(碳)烷二酸是一种短链的单分散聚乙二醇衍生物，由二甘醇原料与溴乙酸叔丁酯发生亲核取代反应后再水解得到的双端羧酸聚乙二醇衍生物。其主要作用是与蛋白质分子或小分子药物上的氨基或者羟基通过酰胺缩合或者酯缩合进行偶联，改变药物分子的结构，进而优化其理化性质。

目前，国内外尚无有关3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度测定方法的报道，主要原因是聚乙二醇衍生物由于其结构、合成方法、纯化方法、及检测方法的特殊性，其组成通常比较复杂，许多成分容易对检测造成干扰。

发明内容

本发明一方面，提供二乙二醇双官能团化乙酸的合成方法，其工艺如图1所示。本发明的另一方面，提供了一种聚乙二醇修饰剂3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度和杂质的测定方法，该方法能降低样品中其他杂质的干扰，准确度高、重复性好、灵敏度高。

如上二乙二醇双羧酸的合成工艺

本发明另一方面涉及一种3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度测定方法，包括如下步骤：

(1)配置样品溶液；

(2)对步骤(1)得到的样品溶液进行HPLC检测；

(3)根据步骤(2)获得的检测结果计算出样品中的3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的纯度。

本发明第一方面的某些实施方式，步骤(1)中，所述的配置样品溶液，包括：称取含3，6，9三噁十一(碳)烷二酸的样品溶于二氯甲烷中，加入DIPEA，充分搅拌后滴加SOCl₂溶液，继续搅拌，加入苄胺，反应结束后，用乙腈转移至容量瓶中，定容，摇匀，即得；其中，所述的SOCl₂溶液为SOCl₂的二氯甲烷溶液。

步骤(1)中，样品浓度为1mg/mL-5mg/mL。

步骤(1)中，3，6，9三噁十一(碳)烷二酸与苄胺的摩尔比为1:1至1:2。

步骤(1)中，反应温度为15℃-40℃。

本发明第一方面的某些实施方式，步骤(2)中，HPLC的检测条件包括如下a至f中的一项或多项：

a.色谱柱为Waters Atlantis T3色谱柱；

优选地，色谱柱规格为150mm(长度)×4.6mm(内径),3μm(粒径)；