[发明专利]一种用于鉴定中国荷斯坦牛乳房炎抗性的引物组合、方法及应用

权利要求书

1.引物组合，包括引物组1—引物组4；

所述引物组1由SEQ ID NO:1所示的正向引物01F1、SEQ ID NO:2所示的正向引物01F2和SEQ ID NO:3所示的反向引物01R组成；

所述引物组2由SEQ ID NO:4所示的正向引物02F1、SEQ ID NO:5所示的正向引物02F2和SEQ ID NO:6所示的反向引物02R组成；

所述引物组3由SEQ ID NO:7所示的正向引物03F1、SEQ ID NO:8所示的正向引物03F2和SEQ ID NO:9所示的反向引物03R组成；

所述引物组4由SEQ ID NO:10所示的正向引物04F1、SEQ ID NO:11所示的正向引物04F2和SEQ ID NO:12所示的反向引物04R组成。

2.如权利要求1所述引物组合，其特征在于：

所述正向引物01F1、所述正向引物02F1、所述正向引物03F1和所述正向引物04F1进行FAM荧光标记；

所述正向引物01F2、所述正向引物02F2、所述正向引物03F2和所述正向引物04F2进行HEX荧光标记。

3.权利要求1或2所述引物组合在制备用于鉴定或辅助鉴定中国荷斯坦牛是否具有乳房炎抗性的试剂盒中的应用。

4.权利要求1或2所述引物组合在制备用于辅助筛查具有乳房炎抗性的中国荷斯坦牛的试剂盒中的应用。

5.权利要求1或2所述引物组合在辅助筛查具有乳房炎抗性的中国荷斯坦牛中的应用；

所述应用用于非疾病的诊断与治疗。

6.权利要求1或2所述引物组合在鉴定或辅助鉴定中国荷斯坦牛是否具有乳房炎抗性中的应用；

所述应用用于非疾病的诊断与治疗。

7.一种辅助筛查待测中国荷斯坦牛是否具有乳房炎抗性的方法，包括如下步骤：检测待测中国荷斯坦牛基于SNP1位点、SNP11位点、SNP15位点和SNP16位点的基因型，然后进行如下判断：

如果待测中国荷斯坦牛基于SNP1位点的基因型为CC纯合型、基于SNP11位点的基因型为CC纯合型、基于SNP15位点的基因型为AA纯合型且基于SNP16位点的基因型为AA纯合型，则待测中国荷斯坦牛具有乳房炎抗性；

如果待测中国荷斯坦牛基于SNP1位点的基因型为TT纯合型和/或基于SNP11位点的基因型为TT纯合型和/或基于SNP16位点的基因型为GG纯合型和/或基于SNP15位点的基因型为GG纯合型，则待测中国荷斯坦牛不具有乳房炎抗性；

SNP1位点为rs135854456；

SNP11位点位于中国荷斯坦牛基因组第5号染色体的第104010752位；

SNP15位点为rs109421300；

SNP16位点为rs109350371；

所述方法用于非疾病的诊断与治疗。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述检测待测中国荷斯坦牛基于SNP1位点、SNP11位点、SNP15位点和SNP16位点的基因型的步骤如下：

(1)以待测中国荷斯坦牛的基因组DNA为模板，分别采用权利要求2所述引物组合中的引物组进行PCR扩增，得到PCR扩增产物；

(2)完成步骤(1)后，采用仪器检测PCR扩增产物的荧光信号，根据荧光信号的颜色获得待测中国荷斯坦牛基于SNP1位点、SNP11位点、SNP15位点和SNP16位点的基因型。