[发明专利]一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法

权利要求书

1.一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、取尿液样品涡旋混匀，加入50ng同位素内标，加入β-葡萄糖醛酸酶、乙酸铵，充分振荡，于37℃水浴条件下水解100min，取出降至室温，乙腈定容，冷冻2h，取出恢复常温后，过0.22μm有机滤膜，得样品溶液；

S2、采用液相色谱-串联质谱对样品溶液进行测试，

其中，液相色谱条件为：

色谱柱为Waters苯基柱，流速0.3mL/min，进样量为5μL，柱温流动相A为0.1％乙酸水溶液，流动相B为乙腈溶液，梯度洗脱程序为：0-4min时，流动相B体积分数为5％；4-6min时，流动相B体积分数为60％；6-8.5min时，流动相B体积分数为90％；8.5-10min时，流动相B体积分数为5％；

其中，质谱条件为：

离子化方式：ESI；电离方式：负电离模式；碰撞气类型：氩气；雾化气流量：3L/min；加热气流量：10L/min；干燥气流量：10L/min；接口温度：300℃；脱溶剂温度：526℃；DL温度：250℃；加热块温度：400℃；扫描模式：MRM；

S3、对照标准曲线进行对邻苯二甲酸酯代谢物进行定性或者定量分析。

2.根据权利要求1所述的一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，步骤S1中，所述乙酸铵的浓度为1mol/L，所述乙酸铵与尿液样品的体积比为4:0.5-1.5。

3.根据权利要求1所述的一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，步骤S1中，冷冻的温度为-25℃。

4.根据权利要求1所述的一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，步骤S1中，所述尿液样品与乙腈的体积比为2:2.5-3.5。

5.根据权利要求1所述的一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，步骤S1中，所述β-葡萄糖醛酸酶在尿液样品的浓度≥850U/mL。

6.根据权利要求1所述的一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，步骤S1中，所述同位素内标包括：¹³C₂-MMP、¹³C₂-MEP、¹³C₂-MCHP、¹³C₂-MBZP、D₄-MIBP、¹³C₄-MEOHP、¹³C₄-MEHHP、¹³C₂-MEHP、¹³C₂-MOP、¹³C₂-MNP、D₄-MDP和¹³C₂-MNBP中的任意一种或多种的混合。

7.根据权利要求1所述的一种快速测定尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量的方法，其特征在于，步骤S3中，所述邻苯二甲酸酯代谢物包括：MMP、MEP、MCHP、MBZP、MIBP、MEOHP、MEHHP、MEHP、MOP、MNP、MDP和MNBP中的任意一种或多种的混合。