[发明专利]一种可利用DNA连接酶促进分子内环化的最适DNA底物及应用有效
| 申请号： | 202111138207.1 | 申请日： | 2021-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN113774054B | 公开（公告）日： | 2023-05-09 |
| 发明（设计）人： | 刘猛;燕毓;常洋洋 | 申请（专利权）人： | 大连理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 周媛媛;李馨 |
| 地址： | 116024 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 dna 连接酶 促进 分子 环化 应用 | ||
1. 一种可利用DNA连接酶促进分子内环化的DNA底物，其特征在于，所述DNA底物为如SEQ ID NO:1所示的核苷酸。
2.根据权利要求1所述的DNA底物，其特征在于，所述DNA底物的二级结构包含一个单链区域SS1、三个短双链P1、P2和P3、一个关键发夹环L1和一个双链间未配对元件J2/3。
3.一种可利用DNA连接酶对随机DNA文库进行反式连接制备单环的连接模板，其特征在于，所述连接模板为如SEQ ID NO:25所示的核苷酸；
所述随机DNA文库为SEQ ID NO:7所示的核苷酸。
4.一种可利用DNA连接酶与随机DNA文库进行反式连接制备互锁双环的连接模板，其特征在于，所述连接模板为如SEQ ID NO:26所示的核苷酸；
所述随机DNA文库为SEQ ID NO:7所示的核苷酸。
5.根据权利要求3所述的连接模板，其特征在于，所述连接模板是将如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的P1和P2劈开，以及将两端结合臂的双链分别延长一定核苷酸；
将两端结合臂的双链分别延长的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30所示。
6.根据权利要求4所述的连接模板，其特征在于，所述连接模板是将如SEQ ID NO:25所示的核苷酸序列的两端引入额外的核苷酸；
SEQ ID NO:25所示的核苷酸序列的两端引入额外的核苷酸分别如SEQ ID NO:31和SEQID NO:32所示。
7.权利要求1-2中任一项所述的DNA底物在DNA分子内环化中的应用。
8.权利要求3或5所述的连接模板在制备DNA单环中的应用。
9.权利要求4或6所述的连接模板在制备DNA互锁双环中的应用。
10.权利要求4所述的连接模板作为环状模板在进行滚环扩增反应中的应用。
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