[发明专利]一种亮菌菌丝体多糖及其制备方法和抑菌用途

说明书

本发明公开了一种亮菌菌丝体多糖及其制备方法和抑菌用途，亮菌菌丝体多糖PAT总糖含量为93.41％，糖醛酸含量为12.24％；单糖组成及摩尔比为甘露糖:鼠李糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:阿拉伯糖＝2.87:6.41::9.56:2.53:0.81。本发明制备的亮菌菌丝体多糖PAT对大肠杆菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌生长过程均具有显著的抑制作用。亮菌菌丝体多糖PAT可作为新型天然抑菌剂，在日化和医药领域有着广泛应用前景。

技术领域

本发明属于功能产品领域，具体涉及一种亮菌菌丝体多糖及其制备方法和抑菌用途。

背景技术

亮菌Armillariella tabescens(Scop.EX.Fr)Sing，又称假蜜环菌，是我国特有的一种珍贵药食两用菌，因其菌丝体在暗处发出浅蓝色荧光而得名。植物学分类归属于伞菌目、白蘑科、杯伞属，其含有亮菌甲素、亮菌乙素等活性成分，已被广泛用于治疗急慢性肝炎、阑尾炎、中耳炎和胆囊炎。多糖作为亮菌生长过程中产生的重要次级代谢产物，研究发现其具有抗肿瘤、降血糖、降血脂和改善胰岛素抵抗等多种药理作用。目前关于亮菌多糖的抗菌作用，鲜有文献报道。

发明内容

本发明旨在提供一种亮菌菌丝体多糖及其制备方法和抑菌用途。本发明设计并优化了发酵技术，聚酰胺法制备具有特定化学组成的亮菌多糖，发现其对大肠杆菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的生长具有显著的抑制作用。本发明制备的亮菌多糖，可广泛应用在日化和医药领域，例如抗菌牙膏、沐浴露和抑菌喷雾剂等天然抑菌产品的开发，具有重要的市场应用价值和开发前景。

本发明亮菌菌丝体多糖，简记为PAT，其总糖含量为93.41％，糖醛酸含量为12.24％；单糖组成及摩尔比为甘露糖:鼠李糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:阿拉伯糖＝2.87:6.41:9.56:2.53:0.81；其分子量分布范围为2.95×10⁴-1.07×10⁶Da。

本发明亮菌菌丝体多糖的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：150g土豆去皮切碎，煮沸30min，6层纱布过滤，加入25g葡萄糖和5gMgSO₄，加水至1000mL，121℃灭菌20min制得葡萄糖-土豆-MgSO₄培养基；将4-6g亮菌Armillariella tabescens(Scop.EX.Fr)Sing菌种(该菌种由合肥诚志生物制药有限公司提供)接种于1000mL葡萄糖-土豆-MgSO₄培养基中，28℃静置培养15天，制得人工液体静置发酵亮菌菌丝体；

步骤2：将步骤1获得的亮菌菌丝体(2000g)粉碎，按照液料比1:10(g/mL)加入蒸馏水，然后90℃浸提3h，重复浸提3次，过80目筛，合并提取液；

步骤3：将步骤2所得提取液浓缩至原体积的1/250，加入4倍体积的95％乙醇，4℃静置12h，4500rpm离心10-15min，收集沉淀物；

步骤4：将步骤3得到的沉淀物加蒸馏水溶解，采用聚酰胺法除蛋白脱色制备亮菌菌丝体多糖。条件为：80g的100-120目聚酰胺和300mL的沉淀物溶液在500mL摇瓶中混匀，室温条件下，摇床200rpm振摇30min，使其充分吸附蛋白质和色素，然后过滤液体，收集滤液、浓缩，冻干为PAT。

本发明亮菌菌丝体多糖的用途，是用于制备抑菌制剂，所述抑菌制剂对大肠杆菌、变形杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的生长具有显著的抑制效果。

本发明通过亮菌菌丝体多糖PAT分别干预大肠杆菌，变形杆菌，枯草芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌的生长，测定干预后的抑菌圈直径、最小抑制浓度和生长曲线来评价其抗菌功效。