[发明专利]一种流式染色试剂盒及其配置方法和应用方法

权利要求书

1.一种流式染色试剂盒，包括固定/破膜液和破膜/洗涤液，其特征在于，所述固定/破膜液含多聚甲醛和/或皂素，所述破膜/洗涤液含皂素、胎牛血清、金属离子螯合剂EDTA以及防腐剂中的一种或者几种。

2.根据权利要求1所述的流式染色试剂盒，其特征在于，所述固定/破膜液使用NaOH调整PH至7.2-7.4之间。

3.根据权利要求1所述的流式染色试剂盒，其特征在于，所述固定/破膜液中多聚甲醛的浓度为2~8%，所述皂素的浓度为0.01~0.05%。

4.根据权利要求1所述的流式染色试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮，即为Proclin 300。

5.根据权利要求1所述的流式染色试剂盒，其特征在于，所述破膜/洗涤液中皂素的浓度为0.5%-2%，胎牛血清的浓度为5%-15%，金属离子螯合剂EDTA的浓度为10mM~100mM。

6.根据权利要求4所述的流式染色试剂盒，其特征在于，所述Proclin 300的浓度为1-10 ppm。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的流式染色试剂盒，其特征在于，所述固定/破膜液溶解在PBS缓冲液中，所述破膜/洗涤液溶解在PBS缓冲液中。

8.权利要求7所述的流式染色试剂盒的配置方法，其特征在于，所述的固定/破膜液按以下步骤配置：

步骤1.1：将磷酸盐缓冲液粉末配置成1 X磷酸盐缓冲液代用；

步骤1.2：用上述1 X磷酸盐缓冲液配置特定浓度的皂素；

步骤1.3：用上述1 X磷酸盐缓冲液在50℃环境中配置特定浓度的多聚甲醛溶液；

步骤1.4：在步骤1.3中配好的多聚甲醛溶液中加入步骤1.2中配好的皂素，搅拌混匀后调节其pH至7.2-7.4，于2-8℃保存；

其内的破膜/洗涤液按以下步骤配置：

步骤2.1：将磷酸盐缓冲液粉末配置成10X磷酸盐缓冲液代用；

步骤2.2：用双蒸水稀释Proclin 300原液至所需浓度；

步骤2.3：用10X磷酸盐缓冲液稀释皂素至所需浓度；

步骤2.4：取所需量的10X磷酸盐缓冲液，向其内依次加入步骤2.2中稀释好的皂素、所需浓度的胎牛血清、步骤2.2中稀释好的皂素、所需浓度的金属离子螯合剂EDTA以及步骤2.1中稀释后的Proclin 300，搅拌混匀后调节pH至7.2-7.4，于2-8℃保存。