[发明专利]一种(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇的酶法生产方法

说明书

本发明涉及一种(S)‑1‑(4‑氯苯基)‑1,3‑丙二醇的酶法生产方法，合成路线如下：其中，R₁，R₂独立地选自C1‑6的烷基。本发明对羰基还原酶进行了筛选，得到了野生型的羰基还原酶WO03及其突变体，发现其对于关键医药中间体(S)‑1‑(4‑氯苯基)‑1,3‑丙二醇的手性还原具有很好的催化活性，酶活性高，立体选择型好，手性纯度＞99.6％。本发明方法不需要要苛刻的低温条件，利于大规模的产业化生产。

技术领域

本发明属于有机合成领域，尤其涉及一种(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇的酶法生产方法。

背景技术

(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇是靶向肝脏药物所使用的关键中间体，已在多个临床及临床前研究药物中使用。例如甲磺酸帕拉德福韦，该肝靶向前药目前由西安新通医药股份有限公司开发，已完成临床二期，目前正在开展临床三期。该关键双醇中间体均采用化学的合成路线。

在专利文献US20030225277中报道了制备方法，工艺路线如下：

US2003/229225，以及文献JACS,2004,vol 126,#16,p5154-5163也报道了类似的合成路线。

上述合成路线在规模化生产时存在三点限制：

(1)需要低温的操作条件，特别是第二步反应需要超低温条件-60℃，对生产设备要求较高，规模化生产有难度；

(2)需要使用有机催化剂(+)-DIPCl(CAS NO:112246-73-8)，该催化剂价格昂贵，催化工艺操作繁琐，难以应用于规模化生产。

(3)还原羧酸使用硼烷，该步反应规模生产的成本较高，且淬灭反应剧烈放热，具有一定安全风险。

(4)制备得到的双醇化合物1的手性纯度为98％，为了满足注册申报要求，需要对其进行精制，进一步增加了生产成本。

上述4点缺陷导致产品的生产成本较高，难以满足规模化生产的需要。因此迫切需要一种可以规模化生产高光学纯度的(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇规模化的方法。

发明内容

为了克服现有技术中制备关键医药中间体(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇制备过程成本高，光学纯度低的缺陷，本发明利用特定羰基还原酶及其突变体作为催化活性物质，制备得到了关键的高立体选择性的手性醇化合物(IM04)，手性纯度＞99.4％，再继续还原得到目标产物(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇，本发明方法不需要要苛刻的低温条件，利于大规模的产业化生产。

为解决上述技术问题，本发明提供了以下的技术方案：

一种(S)-1-(4-氯苯基)-1,3-丙二醇的酶法生产方法，合成路线如下：

其中，R₁，R₂独立地选自C1-6的烷基，比如甲基，乙基，丙基，丁基。

所述羰基还原酶具有对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列，或者对应于对应于SEQID NO：2的氨基酸序列存在下述突变之一或者两种以上的组合：45位的V突变为I(V45I)，63位的K突变为Q(K63Q)，141位的G突变为A(G141A)，141位的G突变为V(G141V)，195位的I突变为L(I195L)，204位的A突变为V(A204V)。