[发明专利]一种用于检测阿特拉津的检测制剂，其试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及生物检测领域，具体讲，涉及一种用于检测阿特拉津的检测制剂，其试剂盒及检测方法。检测制剂包括胶体金试纸条和反应孔，所述胶体金试纸条包括样品垫、NC膜、吸收垫，NC膜上设置有T线和C线；反应孔中冻干保存有阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金；T线处包被有阿特拉津完全抗原，用于竞争结合阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金；C线处包被有羊抗小鼠抗体，用于捕获未结合的所述阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金。本发明的检测制剂在15min内实现对阿特拉津的检测，具有线性范围宽、检测限低、灵敏度高的技术优势。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，具体讲，涉及一种用于检测阿特拉津的检测制剂，其试剂盒及检测方法。

背景技术

阿特拉津(Atrazine，ATZ)又名莠去津，分子式为C₈H₁₄ClN₅。是一种典型的三嗪类除草剂，阿特拉津是选择性内吸传导型苗前、苗后除草剂，主要用于玉米、高粱、甘蔗、果树、林地等旱田，可防除一年生禾本科杂草和阔叶杂草，对某些多年生杂草也有一定的抑制作用。尽管它是低毒除草剂，但其在土壤中具有中等持留性，半存留期最长可达57周。阿特拉津因其化学性质稳定、残留时间长而引起的污染越来越受到人们的关注。在地表水、地下水、土壤以及作物等均检测出阿特拉津阳性，在中国辽东半岛附近的沿海水域，ATZ被发现是主要杀虫剂之一。因为它有潜在的有害影响，包括扰乱激素水平，导致心脏、肺部和肾脏充血等，美国环境保护署(EPA)曾就阿特拉津的使用做出警告，同时在世卫组织公布个致癌物清单中，阿特拉津被列为3类致癌物。

检测阿特拉津的方法主要基于色谱法(高效液相色谱、高效液相色谱-串联质谱法、气相色谱-串联质谱法)和免疫学方法。基于色谱学的方法具有灵敏度高等优点，但是所需仪器昂贵、需要专业人员，不能够满足现场的快速检测需要。免疫检测具有操作简便、分析时间段以及易于实地检测的特点被广泛应用。其中侧流免疫层析试纸免疫法在快速实地检测中具有操作简单、反应迅速、易于读取、成本低廉等优势。然而传统的采用肉眼分辨胶体金免疫层析分析方法多为半定量的检测，且不同操作人员和干扰因素容易对测试的结果带来较大的影响。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提供一种用于检测阿特拉津的检测制剂。

本发明的第二发明目的在于提供一种用于检测阿特拉津试纸条。

本发明的第三发明目的在于提供一种用于检测阿特拉津的检测方法。

为了完成本发明的发明目的，采用的技术方案为：

本发明提出一种用于检测阿特拉津的检测制剂，所述检测制剂包括胶体金试纸条和反应孔，所述胶体金试纸条包括样品垫、NC膜、吸收垫，所述NC膜上设置有T线和C线；

所述反应孔中冻干保存有阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金；包被量为5～10μg/mL的阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金30～80μL，优选为7μg/mL的阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金50μL；

所述T线处包被有阿特拉津完全抗原，用于竞争结合所述阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金；所述T线由T线抗原划线液制备而成，T线抗原划线液中0.5～2.0mg/mL的阿特拉津完全抗原；优选为1.5mg/mL；

所述C线处包被有羊抗小鼠抗体，用于捕获未结合的所述阿特拉津单克隆抗体标记的胶体金；所述C线由C线抗体划线液制备而成，C线抗体划线液中含有0.1～0.3mg/mL的羊抗小鼠抗体，优选为0.3mg/mL。

可选的，T线抗原划线液中含有质量百分比浓度为0.5～3％的PEG20000，优选为1％。

可选的，T线抗原划线液采用10～100mM的PB缓冲液配制而成，优选25～50mM的PB缓冲液；

更优选的，PB缓冲液的pH为6.2。