[发明专利]一种改善茶多酚茶多糖溶解性的方法及所制备复合物与应用

说明书

本发明涉及一种改善茶多酚茶多糖溶解性的方法及所制备复合物与应用，属于植物化学技术领域，本发明首次从普洱熟茶中分离纯化得到一种茶多糖，该化合物结构新颖，具有生物活性，尤其是较好的降糖活性，为进一步研究药用茶多糖提供重要的启示，可用于降糖药物的研发制备。本发明还提供了茶多酚改善高聚茶多糖溶解性的方法，通过多糖‑多酚的相互作用，使高聚茶多糖与多酚类物质在水溶液中自组装形成稳定的大分子复合物，以显著提高高聚茶多糖的溶解性。本发明所提供的茶多糖的增溶方法工艺简单，操作方便，实际应用效果优异，通过茶多糖与茶多酚复配形成的复合物具有显著的协同降糖作用。

技术领域

本发明涉及植物化学功能性成分的溶解技术领域，更具体地，涉及一种茶多糖的提取纯化与改善茶多酚茶多糖溶解性的方法。

背景技术

普洱茶以云南特色大叶茶种制作的特殊茶类。普洱茶中含有大量的茶多糖，是茶汤的主要滋味物质之一。在茶叶中茶多糖含量在6%左右，其组成复杂，属于杂多糖复合物，由糖类、蛋白质和果胶等物质所组成，是具有生物活性的复合多糖。

现代研究表明，茶多糖具有降脂减肥、降血压、调节免疫、抗癌等作用。茶叶中的多糖有中性多糖、酸性多糖两种，而且往往是与蛋白质紧密结合的糖蛋白复合物。目前已经通过动物体内模型试验证明茶多糖确有降血糖作用，主要是通过茶多糖实现清除自由基调节糖类代谢过程中关键酶活性来调节血糖水平减缓胃的倒空速度，减少葡萄糖的吸收。因此茶多糖的研究也越来越引起人们的关注。但是提取出的普洱茶多糖尤其是高聚茶多糖的水溶性差，进而影响茶多糖降糖效果。随着人们对自身健康的日益关注，研究和开发天然降血糖剂以取代化学合成的降血糖剂已是大势所趋。综上所述，如何克服高聚茶多糖难溶的技术难题是本领域技术人员亟需解决的关键技术问题。

发明内容

为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供了一种高聚茶多糖提取纯化及增溶方法，从普洱茶中提取到一种茶多糖，将其与EGCG混合，建立一种自组装复合物。通过对α-葡萄糖苷酶的抑制活性实验，发现PTPs-EGCG复合物比EGCG提高了1.1倍，PTPs-EGCG复合物比PTPs提高了7.8倍，具有较好的降糖作用。

下述的技术方案是用来实现上述的发明目的：

本发明提供的茶多糖是从云南大叶种普洱茶中分离得到的新的多糖，属于一种均一多糖，该多糖分子量≈4.59 KDa，单糖构成为鼠李糖:阿拉伯糖 = 1:7，PTPs的骨架由6个→2)-α-L-Arap-(3→为主链和1个β-L-Rhap-(3→1)-α-L-Arap的重复单元组成，其具有如下结构：

该化合物命名为PTPs，其分子式为C₄₁H₈₂O₄₀。

所述茶多糖的制备方法，具体包括以下步骤：

1)普洱茶叶阴干后粉碎，过筛（40目）作为原料；

2)将步骤1)放入热水萃取器中，加入超纯水，在85℃下萃取2小时，不溶物过滤后得到水萃取物，蒸发浓缩；

3)将步骤2)所得到的浓缩液用95%的乙醇沉淀，在剧烈搅拌下最终浓度为70%；室温静置过夜，离心（4000 r/min, 15 min, 0℃），得到沉淀；用热水（80℃）重新溶解沉淀物并冷却至室温；

4)将步骤3)所得到溶液用Sevag试剂（正丁醇/氯仿1:4，V/V）洗涤去蛋白；最后，通过浓缩和冷冻干燥得到粗茶多糖；

5)将步骤4)所得到粗茶多糖使用DEAE-52柱纯化茶多糖中，用纯水清洗柱，收集洗脱液浓缩；用透析袋去除杂质如单糖和寡糖，冷冻干燥得到白色絮状物；

6)将步骤5)所得到白色絮状物，使用Sephadex G-100柱进一步纯化，用恒流泵和纯化水洗脱，将洗脱液收集，冷冻干燥得到纯化的茶多糖。

作为优选，步骤2)中，原料与水的质量比为1:15。