[发明专利]一种高活性合生元微胶囊及其制备方法

权利要求书

1.一种高活性合生元微胶囊，其特征在于，所述合生元微胶囊包括芯材溶液和壁材溶液；所述芯材溶液由益生植物乳杆菌菌Grx16和冻干保护剂水溶液组成；所述壁材溶液由含有天然高分子材料溶液制备而成；

所述冻干保护剂水溶液由蔗糖、菊粉、脱脂乳三种成分组成；

所述天然高分子材料溶液包括海藻酸钠、乳清分离蛋白两种成分。

2.根据权利要求1所述的高活性合生元微胶囊，其特征在于，所述冻干保护剂水溶液由8.2%蔗糖溶液、8.2%菊粉溶液、8%脱脂乳溶液组成。

3.根据权利要求1所述的合生元微胶囊，其特征在于，所述天然高分子材料溶液中：乳清分离蛋白质量分数为4%-8%，海藻酸钠质量分数1%-9%。

4.根据权利要求1所述的高活性合生元微胶囊，其特征在于，壁材溶液和芯材溶液的体积比即胶菌比为2∶1（mL:mL）-10∶1（mL:mL）。

5.权利要求1-4中任一项所述的高活性合生元微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备活化益生菌菌液：将益生植物乳杆菌菌Grx16菌粉接种至已灭菌冷却的MRS液体培养基中，在37℃恒温培养两代后，收集对数期末期的菌液，8000r/min离心5min，并用生理盐水洗涤，得到菌泥，将菌泥与无菌生理盐水以质量比 1∶1混匀后，调节 pH 至 6.5制得浓缩菌液；

（2）制备保护剂溶液：称取蔗糖、菊粉、脱脂乳，加水去离子水溶解，制备成质量分数分别为8.2%蔗糖溶液、8.2%菊粉溶液、8%脱脂乳溶液冻干保护剂体系，8.2%蔗糖溶液、8.2%菊粉溶液、8%脱脂乳溶液组成冻干保护剂水溶液；

（3）制备芯材溶液：将步骤（1）得到的浓缩菌液与步骤（2）得到的冻干保护剂溶液以体积比 2∶1 混合均匀，得到芯材溶液；

（4）制备壁材溶液：将乳清分离蛋白溶解于去离子水中800r /min搅拌过夜后，80°C 加热30min以完成蛋白质的变性，冷却至室温；将海藻酸钠粉末溶于水中，70℃下水浴加热过夜至粉末充分溶解后，121℃下，灭菌10min，将乳清分离蛋白和海藻酸钠溶液混合，制备出壁材溶液；

（5）制备高活性合生元微胶囊：将步骤（4）制备得到的壁材溶液和步骤（3）获得的芯材溶液混匀后即为水相；然后将所得水相以1:5 (v/v)的比例逐滴加入到含有吐温80(0.2%)的大豆油中，并以700r /min的速度混合10 min；为了分离油包水 (w/o) 乳液，从烧杯的下方快速加入氯化钙 (0.1 M)；在 30 min内形成微珠后，通过 300×g离心 10 min收集它们并用林格氏试剂洗涤两次后即为湿微胶囊，置于真空冷冻干燥机中干燥得到冻干微胶囊。

6.根据权利要求5所述的高活性合生元微胶囊的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，MRS液体培养基为：葡萄糖20.0 g，蛋白胨10.0 g，乙酸钠5.0 g，磷酸氢二钾2.0 g，柠檬酸三铵2.0 g，七水硫酸镁0.20 g，硫酸锰0.05 g，吐温-80 1.0 mL，牛肉膏10.0 g，酵母膏5.0 g，加蒸馏水补充至1000mL，pH 6.5，121℃条件下灭菌15min。

7.根据权利要求5所述的高活性合生元微胶囊的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，培养时间为18-24h，接种比例为每100.0mL培养基中接种3.0mL菌种；生理盐水的质量浓度为0.9%。

8.根据权利要求5所述的高活性合生元微胶囊的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，壁材溶液中乳清分离蛋白质量分数4%-8%，海藻酸钠质量分数1%-9%。

9.根据权利要求5所述的高活性合生元微胶囊的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中，壁材溶液和芯材溶液体积比即胶菌比为2:1-10:1 （mL : mL）；林格氏试剂：氯化钠8.6g，氯化钾0.3g，氯化钙0.28g，加蒸馏水补充至1000mL。

10.根据权利要求5所述的高活性合生元微胶囊的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中，将制备好的高活性合生元微胶囊进行冰箱预冻，预冻温度为－60 ℃，预冻时间为3 h；冻结完全后将预冻好的高活性合生元微胶囊放入冷阱温度为－53.2 ℃，真空度为 0.162mbar 的真空冷冻干燥机内冻干 48 h，然后置于－20 ℃冰箱中保存备用。