[发明专利]一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法

权利要求书

1.一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、分生孢子悬浮液的制备：将菌株T.brev T069转接于PDA培养基上活化培养，于20～30℃恒温培养7～11d出现绿色孢子，用无菌水冲洗孢子，并稀释为0.8～1.2×10⁸CFU/mL的种子液备用；

S2、发酵基质的制备：收集木薯环剥后的皮，将其切成小片烘干，粉碎，过10～100目的木薯皮渣，并混合均匀，称取木薯皮渣溶于水中，并装入组培瓶中灭菌得到发酵基质；

S3、分生孢子粉的制备：将T.brev T069孢子悬浮液按照发酵基质的体积百分比为0.3～1.2％的接种量加入到上述组培瓶中摇匀，于25～30℃恒温培养箱中静置培养2～4d，其中第1～2d时将其取出摇匀以打断菌丝一次，之后将经过T.brev T069发酵后的木薯皮渣晾干后，用粉碎机粉碎3～8s，共粉碎1～3次，粉碎间隔为3～7min，之后将其过300～400目筛，得到T.brev T069分生孢子粉；

S4、可湿性粉剂的制备：将上述孢子粉与湿润剂、分散剂、紫外保护剂、载体混合制得可湿性粉剂，所述可湿性粉剂中包括以下质量百分比原料：孢子粉12～25％、湿润剂0.9～1.3％、分散剂3～8％、紫外保护剂0.8～1.2％，余量为载体。

2.如权利要求1所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述S1分生孢子悬浮液的制备：将菌株T.brevT069转接于PDA培养基上活化培养，于28℃恒温培养9d可见大量绿色孢子，用无菌水冲洗孢子，并稀释为1×10⁸CFU/mL的种子液备用。

3.如权利要求1所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述S2发酵基质的制备：木薯皮渣和水的质量体积比g/mL为5～9：10。

4.如权利要求1所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述S3分生孢子粉的制备是将T.brev T069孢子悬浮液按照1％的接种量加入到组培瓶中摇匀，于28℃恒温培养箱中静置培养3d，其中第2d时将其取出摇匀以打断菌丝一次，之后将经过T.brevT069发酵后的木薯皮渣晾干后，用粉碎机粉碎5s，共粉碎2次，粉碎间隔为5min，之后将其过325目筛，得到T.brevT069分生孢子粉。

5.如权利要求1所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述S3所述可湿性粉剂中包括以下质量百分比原料：孢子粉20％、湿润剂1％、分散剂5％、紫外保护剂1％，余量为载体。

6.如权利要求1或5所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述载体为白炭黑、硅藻土、高岭土、滑石粉、木薯皮粉中的一种，载体浓度为1000～5000μg/ml。

7.如权利要求1或5所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述湿润剂为十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、拉开粉BX、AB-3中的一种。

8.如权利要求1或5所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述分散剂为羧甲基纤维素钠、木质素磺酸钠、亚甲基二萘磺酸钠中的一种。

9.如权利要求1或5所述的一种木霉菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述紫外保护剂为糊精、抗坏血酸、荧光素钠中的一种，其浓度为100～1000μg/ml。