[发明专利]一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗及其制备方法和应用

说明书

本申请涉及生物制药技术领域，具体公开了一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗及其制备方法和应用。一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗的活性成分包括灭活后的大肠埃希氏菌、灭活后的5型金黄色葡萄球菌、灭活后的8型金黄色葡萄球菌、灭活后的336型金黄色葡萄球菌、灭活后的Ⅰa型无乳链球菌、灭活后的Ⅱ型无乳链球菌、灭活后的停乳链球菌、灭活后的乳房链球菌、灭活后的肺炎克雷伯氏菌、灭活后的化脓链球菌；一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗的制备方法包括抗原原液的制备和疫苗的制备。本申请可以安全、高效、全面有效预防奶牛乳房炎，延长免疫持续期。

技术领域

本申请涉及生物制药技术领域，更具体而言，其涉及一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗及其制备方法和应用。

背景技术

奶牛乳房炎(Bovine Mastitis)是由致病性或条件致病性病原微生物感染或理化刺激所引起的奶牛乳腺的一种炎性病变。因其病因复杂，反复发作，是影响全球奶牛业持续发展的三大疾病之一，也是导致奶牛养殖业经济损失最惨重的一种疾病，特别是我国表现更为严重。因此，科学防控奶牛乳房炎已成为关系到国计民生的重大现实问题。

奶牛乳房炎的致病因素多且复杂，如饲养方式、卫生条件、遗传因素、病原微生物感染等，其中病原微生物感染是最主要的致病因素。引起奶牛乳房炎的病原微生物高达150多种，主要为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌，这三种细菌占感染引起奶牛乳房炎的比例超过90％，其中大肠杆菌占30％，金黄色葡萄球菌占46％，链球菌占40％，多以临床型或亚临床型出现，易于分娩或临近分娩时爆发，导致产奶量降低，发病严重淘汰。目前，采用抗生素治疗奶牛乳房炎是最有效的手段，但抗生素易产生耐药性，抗生素残留对畜牧业、人类健康及食品安全与公共卫生安全的危害已引起国际社会高度关注。因此，在当下严格控制抗生素使用的前提下，如何科学防治由病原感染导致的奶牛乳房炎，确保乳制品食品安全是我们面临的严峻挑战。

疫苗是通过增强机体免疫系统的功能从而使机体获得天然的抗病能力，并且疫苗具有安全、稳定、有效等特点，目前疫苗仍是防控传染病最有效的手段之一。对于细菌感染致奶牛乳房炎疫苗而言，国际上结合优势流行菌株与奶牛自身感染特征开展了深入研究并取得了重要成果。一是美国在上世80年代研发及批准上市针对大肠杆菌的J5灭活疫苗，已在美国和欧洲对控制大肠杆菌感染致奶牛乳房炎中发挥重要作用；二是美国勃林格上世纪90年代研发及批准上市针对金黄色葡萄球菌的Lysigin多价裂解疫苗，能够抵抗金黄色葡萄球菌感染且具有一定的保护力；三是西班牙本世纪初研发及批准上市针对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的 STARTVAC灭活疫苗，能安全、有效抵抗大肠杆菌、金黄色葡萄球菌感染致奶牛乳房炎；四是西班牙研发及批准上市针对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓性放线杆菌、无乳链球菌、化脓性链球菌等的多联疫苗MASTIVAC能够有效防控细菌引起的奶牛乳房炎；五是在巴西批准上市的多联疫苗Mastiplus-BR中含有无乳链球菌，停乳链球菌，乳房链球菌，金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，化脓性链球菌，鼠伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯菌，产气肠杆菌和多杀性巴氏杆菌等细菌。分析这些已批准上市商业化产品安全有效。因此，研发适宜中国流行代表菌株和环境的疫苗势在必行。国内研究的奶牛乳腺炎疫苗均处于实验室研究阶段，但由于乳腺炎病原菌复杂，乳腺免疫具有独特性质，研究不深入，细菌苗制造过程中存在技术难题，使得国内尚无高效、商业化运作成熟、广泛使用的奶牛乳腺炎疫苗。奶牛乳房炎多联多价疫苗研发既要集成传统疫苗策略，又要有创新思维，这将是科学防控细菌感染致乳房炎疫苗创新发展的关键所在。

发明内容

为了安全、高效、全面有效预防奶牛乳房炎，延长免疫持续期，本申请提供一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗及其制备方法和应用。

第一方面，本申请提供一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗，采用如下技术方案：

一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗，其活性成分包括灭活后的大肠埃希氏菌、灭活后的5型金黄色葡萄球菌、灭活后的8型金黄色葡萄球菌、灭活后的336型金黄色葡萄球菌、灭活后的Ⅰa 型无乳链球菌、灭活后的Ⅱ型无乳链球菌、灭活后的停乳链球菌、灭活后的乳房链球菌、灭活后的肺炎克雷伯氏菌、灭活后的化脓链球菌；