[发明专利]一种干细胞因子口服药品的制备方法

说明书

本发明公开了一种干细胞因子口服药品的制备方法，涉及生物技术领域，包括以下步骤：获取原代牛脐带充质干细胞；对原代牛脐带充质干细胞进行传代培养；待P3‑P5代牛脐带干细胞培养至细胞融合度达到80‑90%时，采用促分泌培养液进行培养，培养48h后收集上清液，用0.1μm滤膜过滤，再超滤浓缩，获得浓缩液；所述促分泌培养液包括基础培养液和添加在基础培养液中的谷氨酰胺、去甲肾上腺素、转化生长因子、氨基葡萄糖、黄芪多糖；将浓缩液预冻，然后再经超低温冷冻干燥，得冻干粉。本发明能够有效提高脐带间充质干细胞的扩增，诱导干细胞因子的分泌，所得药品能够从细胞层面上调理身体，全面提高身体机能，改善亚健康，修复和强化免疫系统。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种干细胞因子口服药品的制备方法。

背景技术

脐带是哺乳动物和胎儿之间的连系结构，其形状如绳索，表面光滑透明，内含结缔组织、一支脐静脉和一对脐动脉。近年来，随着研究的不断发展，已经能够在脐带、脐血和胎盘中提取干细胞。

脐带间充质干细胞是指存在于脐带组织中的一种多功能干细胞，脐带间充质是一类低免疫原性细胞，具有多向分化潜能，有很强的免疫调节功能，且分离培养操作简便。脐带间充质干细胞一个重要的功能就是通过旁分泌形式分泌多种细胞因子和生长因子进行组织修复，如分泌神经细胞营养因子、血管新生因子、造血支持因子、免疫调节因子、抗凋亡因子和趋化因子等。

干细胞因子的药理药效明显可靠，但是体外培养间充质干细胞收集培养液或细胞裂解液，存在培养规模较小、诱导细胞因子分泌过程不够高效等问题。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种干细胞因子口服药品的制备方法，采用谷氨酰胺、去甲肾上腺素、转化生长因子、氨基葡萄糖、黄芪多糖与基础培养液复配得到的促分泌培养液，用于牛脐带间充质干细胞因子的培养，能够有效提高脐带间充质干细胞的扩增，诱导干细胞因子的分泌。

本发明提出的一种干细胞因子口服药品的制备方法，包括以下步骤：

S1、获取原代牛脐带充质干细胞；

S2、对原代牛脐带充质干细胞进行传代培养；

S3、待P3-P5代牛脐带干细胞培养至细胞融合度达到80-90%时，弃去上清液，使用PBS液清洗，然后采用促分泌培养液进行培养，培养48h后收集上清液，用0.1μm滤膜过滤，再超滤浓缩，获得浓缩液；

所述促分泌培养液包括基础培养液和添加在基础培养液中的谷氨酰胺、去甲肾上腺素、转化生长因子、氨基葡萄糖、黄芪多糖；

S4、将浓缩液预冻，然后再经超低温冷冻干燥，得冻干粉。

优选地，S3中，促分泌培养液中各组分的浓度为：谷氨酰胺 3-6ng/mL、去甲肾上腺素 5-10ng/mL、转化生长因子 2-4ng/mL、氨基葡萄糖 60-80ng/mL、黄芪多糖 5-10ng/mL。

优选地，基础培养基为ɑ-MEM培养液或DMEM/F12培养液。

优选地，S3中，以T75培养瓶计，接种密度为1×10⁵-2×10⁵/mL。

优选地，S4中，还包括向冻干粉中加入药剂学上可接受的助剂，将其加工成口服药物剂型。

优选地，所述口服药物剂型包括胶囊、口服液、片剂。