[发明专利]一种索玛鲁肽的合成方法

权利要求书

1.一种索马鲁肽的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列N端、His侧链上、Glu侧链上、Thr侧链上、Ser侧链上、Asp侧链上、Tyr侧链上、Gln侧链上偶联有保护基的片段I；

b)合成侧链单体Fmoc-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OctadecanedioicAcid)-OH；

c)在固相载体上，按照SEQ ID NO:2所示氨基酸序列C端到N端的顺序逐一偶联保护氨基酸，再偶联步骤b)合成的侧链单体，获得肽树脂，裂解获得片段II；

d)将片段I和片段II按照索马鲁肽的氨基酸顺序缩合，精制，获得索马鲁肽。

2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤a)具体为：

在固相载体上按照SEQ ID NO:1所示氨基酸序列C端到N端的顺序，逐一偶联Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Tyr(Boc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc--Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-Phe-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Boc-His(Trt)-Aib-OH，经裂解、纯化，获得片段I。

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤a)中，所述固相载体为2-CTCResin树脂，Fmoc-Ala-2CTC替代度为0.2-0.6mmol/g；

所述偶联的偶联剂为DIC/HOBt，偶联时间为1-3小时。

4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于，步骤a)中，所述裂解的裂解液由体积比为1:99～5:95的TFA和DCM组成，或由体积比为1:3～1:4的TFE和DCM组成；所述裂解的温度为室温，时间为2小时；

所述纯化为：将裂解后的片段I的粗品浓缩至干，加入乙酸乙酯溶解，采用饱和氯化钠水溶液、柠檬酸水溶液洗涤，收集有机相，浓缩。

5.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤b)具体包括：

b1)将Fmoc-Lys-OH与Boc-AEEA-OSu混合，加入DIPEA，室温反应2小时，浓缩，加入HCl/EA饱和液，脱除Boc保护基，浓缩至干；重复以上步骤，偶联第二个Boc-AEEA-OSu，将偶联产物精制后获得产物1：Fmoc-Lys(AEEA-AEEA)-OH；

b2)取十八烷酸叔丁基单酯，加入THF、Boc酸酐和无水吡啶，室温反应0.5小时，然后加入NH2-Glu(OtBu)-OH，搅拌反应2小时，加入乙醚，析出固体，得到产物2：γ-Glu(OtBu)-OctadecanedioicAcid；

b3)在DCC和DCM的作用下，将产物1和产物2产物缩合反应2小时，得到侧链单体Fmoc-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OctadecanedioicAcid)-OH。

6.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，所述精制为：将偶联产物加入乙酸乙酯溶解，滴加石油醚，析出沉淀，过滤。

7.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于，步骤c)具体为：

在固相载体上按照SEQ ID NO:2所示氨基酸序列C端到N端的顺序，逐一偶联Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH之后，再偶联侧链单体Fmoc-Lys(AEEA-AEEA-γ-Glu-OctadecanedioicAcid)-OH，经裂解、纯化，获得片段II。