[发明专利]一种发酵用嗜热链球菌，筛选方法及其在樱桃酵素发酵中的应用

权利要求书

1. 一种嗜热链球菌LVF02，保藏号为CCTCC M 20211096。

2.如权利要求1所述的嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，按照以下步骤进行：

(1)采摘新鲜、成熟的樱桃果实，去核后加入无菌水，通过均质器制成樱桃浆；富集培养，得发酵液；

(2)取发酵液用无菌水稀释，得到发酵液的稀释液；

(3)将所述发酵液的稀释液200µl涂布于20ml～30mlMRS培养基中培养，随机选取单菌落，采用平板划线1～3次分离得到单菌落，经鉴定为嗜热链球菌；

(4)将嗜热链球菌进行产酸性能分析、发酵性能分析，筛选出发酵用嗜热链球菌株；

所述MRS培养基为：蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母浸粉4g，葡萄糖20g，磷酸氢二钾2g，柠檬酸氢二铵2g，乙酸钠5g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.04g，吐温80 1g，琼脂粉20g，加入1L纯净水，溶解后调节pH至5.7±0.2，121℃灭菌20min。

3.如权利要求2所述的嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，步骤1）所述樱桃果实与无菌水的质量比为1:1～10。

4.如权利要求2所述的嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，所述富集培养是在温度为35～45℃条件下，发酵36～48h。

5.如权利要求2所述的嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，所述稀释为将发酵液与无菌水按照体积比为1:10～100进行稀释。

6.如权利要求1所述嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，所述培养条件为温度35℃～45℃，时间2～5天。

7.如权利要求1所述嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，产酸性能分析和发酵性能分析为：取一环嗜热链球菌加入到100ml～300ml樱桃浆中，在35℃～45℃培养12～72h，测定樱桃浆中的总酸含量和嗜热链球菌菌落数。

8. 如权利要求6所述嗜热链球菌的筛选方法，其特征在于，樱桃浆中的总酸含量6g/L；嗜热链球菌菌落数2.00×10⁷ cfu/mL。

9.一种嗜热链球菌在樱桃酵素中的应用，其特征在于，将上述权利要求制备的嗜热链球菌应用于樱桃酵素中，按照以下步骤进行：

（a）成熟度较好的100g樱桃经过去核后，加入2～10倍纯净水进行打浆，得樱桃浆；取100mL樱桃浆加入到250mL三角瓶中，92℃灭菌20min，得灭菌樱桃浆；

（b）从嗜热链球菌斜面取1～3环接种于灭菌樱桃浆中，35℃～45℃静置培养12～24h，作为种子液；

（c）按照5～10%的体积比接种种子液于步骤（a）的灭菌樱桃浆中，在35℃～45℃静置培养12～72h，得到樱桃酵素。

10. 如权利要求9所述嗜热链球菌在樱桃酵素中的应用，其特征在于，步骤（c）中培养72h，樱桃酵素中维生素C25mg/100mL，花青素240mg/L，氨基酸总量840mg/100mL，总酸8g/L，菌落数2.00×10⁷ cfu/mL。