[发明专利]一种促进滇金石斛原球茎快速增殖的方法

权利要求书

1.一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：采集滇金石斛成熟无病虫害，果实外壳呈黄绿色，种龄为6个月的未开裂蒴果作为外植体，并进行预处理；

S2：使用充分灼烧后的解剖刀横向切开S1预处理过的蒴果，用镊子夹住蒴果，将无菌种子均匀撒播在诱导培养基中，培养30-60天后得到滇金石斛原球茎；

S3：将S2诱导出的滇金石斛原球茎转接到增殖培养基使其快速繁殖培养，培养30-40天后得到绿色、个体大、饱满、有圆锥状芽的滇金石斛原球茎。

2.根据权利要求1所述的一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，其特征在于，所述S1中，预处理的方法为：首先用自来水反复冲洗蒴果，再使用洗洁精浸泡10min，用自来水冲洗6次，沥干水，放置在超净工作台上备用，在超净工作台上，将蒴果使用75％酒精溶液灭菌30s，再用无菌水冲洗3次，然后用3.5％次氯酸钠溶液处理8min，再用无菌水冲洗6次，放置于无菌纸上吸干水，待入瓶。

3.根据权利要求1所述的一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，其特征在于，所述S2中，诱导培养基的配置方法为：以MS为基础培养基，添加1.0mg/L的6-苄氨基嘌呤，0.1mg/L的萘乙酸，3％的蔗糖和8g/L的琼脂粉，将诱导培养基分装后，通过高压灭菌锅灭菌冷却后使用，所述诱导培养基的pH值为5.8。

4.根据权利要求1所述的一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，其特征在于，所述S3中，增殖培养基的配置方法为：以MS为基础培养基，添加0.5mg/L的6-苄氨基嘌呤，0.5mg/L的萘乙酸，3％的蔗糖和8g/L的琼脂粉，将增殖培养基分装后，通过高压灭菌锅灭菌冷却后使用，所述增殖培养基的pH值为5.8。

5.根据权利要求1所述的一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，其特征在于，所述S2和S3中，诱导培养与增值培养均在培养室中进行，所述培养室的温度为(24±2)℃，光照12h/d，光照强度为1500-2000Lx。