[发明专利]一种促进滇金石斛原球茎快速增殖的方法

说明书

本发明公开了一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，包括如下步骤：S1：采集滇金石斛成熟无病虫害，果实外壳呈黄绿色，种龄为6个月的未开裂蒴果作为外植体，并进行预处理；S2：使用充分灼烧后的解剖刀横向切开S1预处理过的蒴果，用镊子夹住蒴果，将无菌种子均匀撒播在诱导培养基中，培养30‑60天后得到滇金石斛原球茎；S3：将S2诱导出的滇金石斛原球茎转接到增殖培养基使其快速繁殖培养，培养30‑40天后得到绿色、个体大、饱满、有圆锥状芽的滇金石斛原球茎，本发明不仅繁殖倍数高，生长迅速，而且基本不会导致品种变异，可以保持品种的稳定性，能够大幅提高滇金石斛的繁殖率，解决滇金石斛产量低的问题，是保护濒危植物、缓解资源稀缺的可行性措施。

技术领域

本发明涉及植物培养技术领域，尤其涉及一种促进滇金石斛原球茎快速增殖的方法。

背景技术

滇金石斛(Flickingeria albopurpurea Seidenf.)为兰科金石斛属植物。茎黄褐色且下垂多分枝，叶革质，花梗和子房淡黄色，萼片和花瓣白色，花质地薄，开放仅半天则凋谢，原生植物其根状茎弯曲匍匐于海拔800-1200米的山地疏林中树干上或林下岩石上，主要产于中国云南省南部、泰国、越南和老挝，可做盆花和盆景，具有较高的园艺价值和药用价值。滇金石斛被列入濒临绝种野生动植物国际贸易公约(Convention on InternationalTrade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora)，同时属于国家二级保护野生植物，为石斛属植物近缘属的金石斛属植物。但是，滇金石斛繁殖系数小且耗时长，繁殖率低，产量低的问题极其严重，已不能满足日益增长的市场需求。因此，急需开发一种促进滇金石斛原球茎快速增殖的方法以解决上述技术问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的是提供的一种促进滇金石斛原球茎快速增殖的方法，通过促进滇金石斛原球茎快速繁殖，使滇金石斛在组织培养快速繁殖出具有同样的物质代谢和形态发育潜能的植株，不仅繁殖倍数高，生长迅速，而且基本不会导致品种变异，可以保持品种的稳定性，能够大幅提高滇金石斛的繁殖率，解决滇金石斛产量低的问题，是保护濒危植物、缓解资源稀缺的可行性措施。

为了实现上述目的，本发明提供的一种促进滇金石斛原球茎快速繁殖的方法，包括如下步骤：

S1：采集滇金石斛成熟无病虫害，果实外壳呈黄绿色，种龄为6个月的未开裂蒴果作为外植体，并进行预处理；

S2：使用充分灼烧后的解剖刀横向切开S1预处理过的蒴果，用镊子夹住蒴果，将无菌种子均匀撒播在诱导培养基中，培养30-60天后得到滇金石斛原球茎；

S3：将S2诱导出的滇金石斛原球茎转接到增殖培养基使其快速繁殖培养，培养30-40天后得到绿色、个体大、饱满、有圆锥状芽的滇金石斛原球茎。

优选地，所述S1中，预处理的方法为：首先用自来水反复冲洗蒴果，再使用洗洁精浸泡10min，用自来水冲洗6次，沥干水，放置在超净工作台上备用，在超净工作台上，将蒴果使用75％酒精溶液灭菌30s，再用无菌水冲洗3次，然后用3.5％次氯酸钠溶液处理8min，再用无菌水冲洗6次，放置于无菌纸上吸干水，待入瓶。

优选地，所述S2中，诱导培养基的配置方法为：以MS为基础培养基，添加1.0mg/L的6-苄氨基嘌呤，0.1mg/L的萘乙酸，3％的蔗糖和8g/L的琼脂粉，将诱导培养基分装后，通过高压灭菌锅灭菌冷却后使用，所述诱导培养基的pH值为5.8。

优选地，所述S3中，增殖培养基的配置方法为：以MS为基础培养基，添加0.5mg/L的6-苄氨基嘌呤，0.5mg/L的萘乙酸，3％的蔗糖和8g/L的琼脂粉，将增殖培养基分装后，通过高压灭菌锅灭菌冷却后使用，所述增殖培养基的pH值为5.8。