[发明专利]新型冠状病毒德尔塔突变株的检测方法及核酸检测试剂盒在审
申请号: | 202111175410.6 | 申请日: | 2021-10-09 |
公开(公告)号: | CN113981140A | 公开(公告)日: | 2022-01-28 |
发明(设计)人: | 蒋析文;彭海龙;范建;林玉 | 申请(专利权)人: | 广州达安基因股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12N15/11;C12Q1/6851 |
代理公司: | 上海助之鑫知识产权代理有限公司 31328 | 代理人: | 陈详 |
地址: | 510665 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 冠状病毒 德尔塔 突变 检测 方法 核酸 试剂盒 | ||
1.一种用于检测新型冠状病毒及其德尔塔(Delta)变异株的引物对集,其特征在于,所述引物对集包括第一引物对组,所述第一引物对组包括第一引物对和第二引物对:
其中,所述第一引物对特异性扩增新型冠状病毒ORF1ab基因,所述第一引物对包括:
如SEQ ID NO.10所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.11所示的反向引物;
所述第二引物对特异性扩增新型冠状病毒德尔塔变异株S基因P681R位点,所述第二引物对包括:
如SEQ ID NO.7所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.8所示的反向引物。
2.如权利要求1所述的引物对集,其特征在于,所述引物对集还包括第三引物对,所述第三引物对特异性扩增新型冠状病毒德尔塔变异株S基因L452R位点,所述第三引物对包括:
如SEQ ID NO.1所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.2所示的反向引物。
3.如权利要求2所述的引物对集,其特征在于,所述引物对集还包括第四引物对,所述第四引物对特异性扩增新型冠状病毒德尔塔变异株S基因T478K位点,所述第四引物对包括:
如SEQ ID NO.4所示的正向引物;和,如SEQ ID NO.5所示的反向引物。
4.一种用于用于检测新型冠状病毒及其德尔塔变异株的探针集,其特征在于,所述探针集包括:
核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示的第一探针;
核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示的第二探针。
5.如权利要求4所述的探针集,其特征在于,所述探针集还包括核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示的第三探针;
优选地,所述探针集还包括核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的第四探针。
6.一种用于检测新型冠状病毒及其德尔塔变异株的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的引物对集;和权利要求4所述的探针集。
7.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括选自下组的一种或多重成分:热启动Taq酶、逆转录酶、UDG酶(尿嘧啶-N-糖基化酶)、dNTPs。
8.如权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括第一容器,所述第一容器内包含第一引物探针混合液,所述第一引物探针混合液包括:所述第一引物对、所述第二引物对、所述第一探针和所述第二探针标。
9.一种检测新型冠状病毒及其德尔塔变异株的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(1)提供待检测对象的核酸样本;
(2)制备荧光定量PCR反应体系并进行荧光定量PCR检测:
其中,所述荧光定量PCR反应体系包括:步骤(1)提供的所述核酸样本、权利要求1所述的引物对集、和权利要求4所述的探针集。
10.权利要求1所述的引物对集、和/或权利要求4所述的探针集的用途,用于制备PCR检测试剂盒,所述PCR检测试剂盒用于检测新型冠状病毒及其德尔塔变异株。
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