[发明专利]综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法及其应用在审
申请号: | 202111178731.1 | 申请日: | 2021-10-09 |
公开(公告)号: | CN114053315A | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 张宝堂;廖娜;谭家忠 | 申请(专利权)人: | 湖南绿蔓生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A61K36/185 | 分类号: | A61K36/185;C07H1/08;C07H15/256 |
代理公司: | 长沙启昊知识产权代理事务所(普通合伙) 43266 | 代理人: | 李儒 |
地址: | 410001 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 综合 提取 中的 甜茶苷 甜茶总多酚 甜茶总 黄酮 方法 及其 应用 | ||
1.一种综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法,其特征在于,
包括,
S1、水提取
将粉末状甜茶原料加入水中,提取后固液分离,得到水提液备用;
S2、上柱吸附
将水提液浓缩后通过非极性大孔树脂柱吸附,随后分别用水、10-20v%乙醇水溶液和70-80v%乙醇水溶液洗脱,分别收集得到水洗脱液、10-20v%乙醇洗脱液和70-80v%乙醇洗脱液;
S3、甜茶苷的提取和纯化
将步骤S2中的70-80v%乙醇洗脱液进行后处理,得到甜茶苷;
S4、甜茶总多酚的提取和纯化
将步骤S2中的水洗脱液和10-20v%乙醇洗脱液合并后浓缩至原体积的0.5-0.7倍,加入絮凝剂并静置沉淀后固液分离,得到上清液和沉淀,将沉淀加水溶解并调pH后过滤,将滤液通过第一弱极性大孔树脂柱吸附,随后用40-60v%乙醇水溶液洗脱,将收集得到的40-60v%乙醇洗脱液经去醇并加水稀释2-5倍后用等量乙酸乙酯萃取,分别收集水层和乙酸乙酯层,将水层浓缩干燥即得甜茶总多酚;
S5、甜茶总黄酮的提取和纯化
将步骤S4中的上清液通过第二弱极性大孔树脂柱吸附后分别用水和20-40v%乙醇水溶液洗脱,将收集得到的20-40v%乙醇洗脱液去醇并加水稀释,通过聚酰胺树脂柱后依次用水和pH 7-8、30-50v%乙醇水溶液洗脱,最后将收集得到的30-50v%乙醇洗脱液浓缩干燥即得甜茶总黄酮I,并将步骤S4中乙酸乙酯层浓缩干燥即得甜茶总黄酮II。
2.根据权利要求1所述的综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法,其特征在于,
步骤S2中,
所述水、10-20v%乙醇水溶液和70-80v%乙醇水溶液的洗脱体积分别为1-3BV、2-4BV和1.5-3BV;
和/或,所述水提液浓缩后的浓度、上柱流速和吸附时间分别为0.2-0.8g/ml、1-3BV/h和2-5h;
和/或,所述非极性大孔树脂柱为X-5型、H-103型、CAD-40型、SIP-1300型、XAD-1600型和D101型大孔树脂柱中的一种。
3.根据权利要求1或2所述的综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法,其特征在于,
步骤S4中,
所述沉淀经加水并用酸调pH至5-6后,加热至50-60℃搅拌溶解,优选地,所述酸为醋酸、柠檬酸和盐酸中的至少一种;
和/或,所述滤液的上柱流速和吸附时间分别为0.5-2BV/h和2-4h;
和/或,所述40-60v%乙醇水溶液的洗脱体积和洗脱流速分别为1.5-2BV和1-2BV/h;
和/或,所述乙酸乙酯萃取的次数为3-4次。
4.根据权利要求1-3任一项所述的综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法,其特征在于,
步骤S4中,
所述絮凝剂为15-35wt%的石灰乳,优选地,所述石灰乳的加入量为控制其pH为7-8;
和/或,所述静置沉淀的时间为12-24h。
5.根据权利要求1或2所述的综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法,其特征在于,
步骤S5中,
所述上清液的上柱流速为1-3BV/h;
和/或,在洗脱第二弱极性大孔树脂柱的过程中,所述水的洗脱体积和洗脱流速分别为2-3BV和1-3BV/h,所述20-40v%乙醇水溶液的洗脱体积和洗脱流速分别为1-2BV和1-3BV/h;
和/或,所述20-40v%乙醇洗脱液经浓缩至无醇味后再加水稀释1-3倍,随后以0.8-1.5BV/h的速度通过聚酰胺树脂柱;
和/或,在洗脱聚酰胺树脂柱的过程中,所述水和30-50v%乙醇水溶液的洗脱体积分别为1-2BV和1-2BV。
6.根据权利要求1-5任一项所述的综合提取甜茶中的甜茶苷、甜茶总多酚和甜茶总黄酮的方法,其特征在于,
所述第一弱极性大孔树脂柱和第二弱极性大孔树脂柱分别为AB-8型、DA型和DM130型大孔树脂柱中的一种。
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