[发明专利]一种阿伐那非及其中间体的光学异构体分离检测方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种阿伐那非及其中间体的光学异构体分离检测的方法，该方法是采用Waters高效液相色谱仪，多糖衍生物涂敷型手性色谱柱，流动相以正己烷和无水乙醇的体积比为80：20为流动相A，以正己烷和无水乙醇的体积比为20：80为流动相B，进行梯度洗脱。该方法不仅能将阿伐那非与其光学异构体完全分离，同时也能将阿伐那非中间体与其光学异构体进行有效分离，本发明的方法不仅适用于阿伐那非中间体中其光学异构体含量的测定，同时能检测阿伐那非中其光学异构体、中间体及其光学异构体的含量，该方法简便，高效，准确，使阿伐那非的质量可控，并最终确定产品的安全。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及用高效液相色谱法测定阿伐那非及其中间体的光学异构体的方法。

背景技术

阿伐那非(Avanafil)，化学名为(S)-4-[(3-氯-4-甲氧基苄基)氨基]-2-[2-(羟甲基)-1-吡咯烷基]-N-(2-嘧啶基甲基)-5-嘧啶甲磺酰胺，其分子式为C23H26ClN7O3，分子量为483.95，CAS号为330784-47-9，其结构式见下式(a)化合物。

阿伐那非中间体，化学名为(S)-4-[(3-氯-4-甲氧基苄基)氨基]-2-[2-(羟甲基)-1-吡咯烷基]嘧啶-5-羧酸乙酯，其分子式为C₂₀H₂₅ClN₄O₄，分子量为420.89，CAS号为330785-83-6，其结构式见下式(b)化合物。

阿伐那非是由日本田边制药公司和VIVUS公司开发，2012年4月27日在美国已被批准上市，片剂规格有50mg、100mg、200mg。阿伐那非是一种口服的高选择性磷酸二酯酶-5抑制剂，其可增加阴茎的血流量，用于治疗勃起功能障碍。在其结构中存在一个手性碳中心，在其合成过程中会产生D-对映异构体，D-对映异构体在合成过程中作为杂质进行控制。对于手性药物而言，对光学异构体进行质量控制是药学研究工作的重点和难点。

在阿伐那非的合成工艺路线中，中间体也存在手性碳中心，为有效保障终产物的质量，中间体中对对映异构体的控制尤为重要。

在手性药物研发能力得到很大进步的当下，研发药物的安全性和有效性已成为制药行业关注的重点，而手性药物研究过程中使用的手性色谱分离与制备技术目前也起到至关重要的作用，手性药物质量控制不仅引起很高的重视，控制指标也越来越严格。高效液相色谱法是最常用的手性药物分析方法之一，其中高效液相色谱手性固定相法更是简便，快捷，灵敏，键合型纤维素手性固定相具有性能稳定，拆分效果好，使用范围广等优点。

各国药典并未收录阿伐那非及其中间体的光学异构体的检测方法，文献和专利中与阿伐那非相关的均无涉及到光学异构体的检测方法，因此，建立一种利用高效液相色谱法准确快速测定阿伐那非及其中间体的光学异构体的简便方法具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供阿伐那非及其中间体的光学异构体分离检测方法，该方法使阿伐那非与其光学异构体、中间体、中间体光学异构体均能够有效分离，为阿伐那非的合成工艺研究和质量控制提供更为可靠的依据。该方法高效、快速、操作简便、大大提供工作的效率，节约时间成本。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种阿伐那非及其中间体的光学异构体分离检测方法，所述高效液相色谱法分析过程中采用的是多糖衍生物涂敷型手性色谱柱，DAD检测器或紫外检测器，以正己烷：低级醇为流动相，正己烷：低级醇的体积比为80：20-20：80，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱方法为：