[发明专利]双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽及其制备方法

权利要求书

1.双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、植物乳杆菌发酵培养，将发酵液离心得到上清液；

S2、采用无水乙醇和硫酸铵配制双水相萃取体系，其中双水相萃取体系中无水乙醇的体积浓度为32-36％，硫酸铵的质量体积比为20-24％；

S3、将上述步骤S1获得的发酵上清液加入到步骤S2获得的双水相萃取体系中进行萃取，静置分液成两相后，收集上相萃取液；

S4、向步骤S3收集的上相萃取液中加入其体积2.5倍的无水乙醇，析出无机盐后，离心分离得到纯化的上清液；

S5、将步骤S4的纯化上清液使用旋转蒸发仪干燥浓缩后，得到活性多肽提取产品。

2.根据权利要求1所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，所述步骤S1中，植物乳杆菌发酵培养方法为：将植物乳杆菌活化菌液接种于MRS发酵培养基中，在37℃、180r/min的条件下发酵培养48h。

3.根据权利要求1所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，所述步骤S1中，发酵液离心是在转数为8000r/min的离心机中进行固液分离，离心时间10min。

4.根据权利要求1所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，所述步骤S3中，发酵上清液与双水相萃取体系体积百分比为50-58％，所述双水相萃取体系pH为3.5-4.0，萃取温度为55-65℃，萃取时间为30-60min。

5.根据权利要求1所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，所述步骤S4中，离心分离是在转数为5000r/min的离心机中离心处理5min。

6.根据权利要求1所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，所述步骤S5中，旋转蒸发仪干燥温度为65℃，压力0.1Mpa。

7.根据权利要求2所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法，其特征在于，每升MRS发酵培养基包括以下组分：蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母浸粉5.0g，葡萄糖20.0g，吐温-80 1.0mL，磷酸氢二钾2.0g，含水醋酸钠5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，所述MRS发酵培养基的pH为6.2-6.6。

8.如权利要求1-7任一所述的双水相萃取植物乳杆菌发酵液中活性多肽的方法制得的活性多肽。