[发明专利]活细胞膜整合素αv

权利要求书

1.一种活细胞膜整合素α_vβ₃聚糖的原位糖链延长方法，其特征在于偶联整合素α_vβ₃特异性识别多肽(Pep)和半乳糖氧化酶(GAO)，制备聚糖重构探针Pep-GAO，该探针在被K₄[Fe(CN)₆]抑制酶活性的条件下，识别活细胞表面α_vβ₃，然后加入K₃[Fe(CN)₆]激活GAO活性，特异性氧化α_vβ₃糖链上的半乳糖/N-乙酰半乳糖胺(Gal/GalNAc)生成可以发生生物正交反应的醛基，该基团与酰肼功能化的糖分子发生连接反应，实现α_vβ₃糖链的延长。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于以琥珀酰亚胺酯和马来酰亚胺双修饰的聚乙二醇1000(NHS-PEG1000-MAL)为连接分子，偶联GAO的氨基和巯基修饰的c(RGDfK)多肽，制备聚糖重构探针Pep-GAO。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在K₄[Fe(CN)₆]存在下，Pep-GAO特异性结合细胞表面α_vβ₃，过程中GAO活性被抑制不能催化氧化反应，而在洗掉未结合探针，加入K₃[Fe(CN)₆]后，激活的GAO由于被限域在α_vβ₃上，只能特异性氧化α_vβ₃糖链末端的Gal/GalNAc生成生物正交基团醛基。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于通过己二酸二酰肼与糖分子反应制得酰肼修饰的糖分子，进而与活细胞表面α_vβ₃糖链上生成的醛基发生连接反应生成腙键，实现整合素α_vβ₃聚糖的原位糖链延长。