[发明专利]一种果桑新品种‘粤椹201’的SSR分子标记及其核心引物组、试剂盒和应用

说明书

本发明公开了一种果桑新品种‘粤椹201’的SSR分子标记及其核心引物组、试剂盒和应用。本发明利用荧光SSR技术，通过对桑树基因组序列设计开发出的300对SSR引物进行筛选，确认标记M20310和M252的核心引物能够分别对果桑新品种‘粤椹201’扩增出两条特异性条带，可以分别从果桑品系中鉴别出果桑新品种‘粤椹201’，可用于果桑新品种‘粤椹201’的快速鉴定和检测。本发明通过直接检测‘粤椹201’的M20310标记和/或M252标记对其进行鉴定，克服了外部形态特征对其鉴定的不确定性，操作简单，检测效率高，结果可靠直观，为果桑新品种‘粤椹201’的保护提供了科学的技术保障，本发明有利于该品种的推广利用和保护。

技术领域

本发明涉及到品种资源的鉴定和种质创新技术领域，具体涉及一种果桑新品种‘粤椹201’的SSR分子标记及其核心引物组、试剂盒和应用。

背景技术

果桑是以桑果生产为目的，果用或果叶兼用桑树统称，是我国丰富的桑树种质资源的重要类型组成之一。果桑作为一种新型果树，因其桑果具有的独特口味，丰富的营养和较高的活性物质而受到人们的喜爱， 种植面积和区域不断扩大，并呈现出了良好的发展前景。除鲜食外，桑果被加工开发成桑果汁、桑果酒、桑果酱、桑果红色素、桑果醋等多种产品，桑果产业初具规模，并呈现出良好的多元化发展势头。

‘粤椹201’是广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所以实生苗为材料，经人工诱导定向培育而育成的果桑新品种，属广东桑种，2020年获得了国家植物新品种权（CNA20184672.5）。其特征在于：树形开展，枝条粗而长，主枝发条数多，侧枝萌发力弱；皮色黄褐，皮色黄褐，节间直，五列叶序；皮孔大，稀，圆形、椭圆形。冬芽短三角形，棕褐色，大小中等，尖离，副芽大且数量较少；枝条根源体平，芽褥状态微凸。幼叶花色苷显色无或弱，顶端叶着生姿态斜上，叶柄着生姿态上举；植株叶片形状全叶，叶面平展，叶心形，深绿色，叶尖短尾状，叶缘细圆齿，叶基浅心形，叶面皱缩程度中等，光泽性弱，叶柄粗短，平均4.2 cm。广东省广州市白云区栽培，桑果始熟期3月中上旬，持续采收期30～35 d。一年生嫁接苗当年春季种植第2年即可挂果，第3年即可进入丰产期，产量27000 kg· hm^-2 以上。

‘粤椹201’是近年来新育成并获得国家植物新品种授权的果桑新品种，因其具有的产量高、品质优的特点，近年来各地不断涌现出其他品种假冒该品种，但因苗期外部形态特征难以区分辨别品种的真实性，难以有效的监督和仲裁，给该品种的开发利用带来了较大的影响。因此急需找一种真实有效、不受环境影响，能够准确区分该品种的简单、快速和有效的鉴别技术。

传统的果桑新品种鉴定主要是以表型性状为基础，受环境影响较大、稳定性差、测试周期长，严重影响了新品种鉴定的有效性和权威性。分子标记技术因其具有多态性高、测试周期短、不受环境影响等特性，成为品种鉴定和保护的未来发展方向。其中简单重复序列( Simple sequence repeat，SSR )具有共显性、重复性好、易检测、操作简单等优点，因此，SSR分子标记在果桑新品种特异性评价与保护中具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是：提供一种果桑新品种‘粤椹201’的SSR分子标记及其核心引物组、试剂盒和应用，操作简单，可用于果桑新品种‘粤椹201’真实性的鉴定，当出现品种假冒或有争议时可以有效的监督和仲裁。

本发明的第一个目的是提供一种鉴定果桑新品种‘粤椹201’的SSR分子标记，包括SSR分子标记M20310和/或M252；所述的SSR分子标记M20310的重复基序为(ATT)n，其中n≥5，其右侧序列如SEQ ID NO.6所示，其左侧序列如SEQ ID NO.5所示；所述的SSR分子标记M252的重复基序为(AT)n，其中n≥6，其右侧序列如SEQ ID NO.8所示，其左侧序列如SEQ IDNO.7所示。

本发明的第二个目的是提供一种鉴定果桑新品种‘粤椹201’的SSR分子标记的核心引物组，包括针对SSR分子标记M20310的引物和/或针对SSR分子标记M252的引物：