[发明专利]靶向树突状细胞表达H7N9禽流感HA1抗原的重组乳酸菌及其应用

权利要求书

1.一种表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌，其含有HA1-DCpep融合基因，所述HA1-DCpep融合基因由HA1基因片段与3个DCpep基因片段串联组成；

所述HA1-DCpep融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3中所示。

2.根据权利要求1所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌，其特征在于，所述HA1-DCpep融合基因中还含有启动子、终止子和酶切位点基因序列。

3.根据权利要求2所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌，其特征在于，所述酶切位点为Xba I和Hind III。

4.根据权利要求1-3任一项所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌，其特征在于，所述重组乳杆菌中还导入了pWCF的基因片段，如SEQ ID NO：4中所示的核苷酸序列。

5.根据权利要求4所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌，其特征在于，所述重组植物乳杆菌以植物乳杆菌NC8为原始出发菌株。

6.根据权利要求5所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌，其特征在于，所述重组植物乳杆菌为丙氨酸消旋酶基因缺陷型植物乳杆菌NC8/Δalr。

7.一种融合基因HA1-DCpep，其由HA1基因片段与3个DCpep基因片段串联组成；

所述HA1-DCpep融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3中所示。

8.根据权利要求7所述的融合基因HA1-DCpep，其特征在于，所述HA1-DCpep融合基因中还可以含有启动子、终止子和酶切位点基因序列。

9.根据权利要求8所述的融合基因HA1-DCpep，其特征在于，所述酶切位点为Xba I和Hind III。

10.一种融合蛋白，其由权利要求9所述的融合基因HA1-DCpep编码，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。

11.根据权利要求10所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白由权利要求1至6中任一项所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌表达产生；所述融合蛋白的氨基酸序列中包含表面锚定元件pgsA’表达产生的氨基酸，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：6中所示。

12.含有权利要求7所述的融合基因HA1-DCpep的表达载体。

13.根据权利要求12所述的融合基因HA1-DCpep的表达载体，其特征在于，所述表达载体由融合基因HA1-DCpep与载体pWCF连接得到，所述pWCF为SEQ ID NO：4中所示的核苷酸序列。

14.一种药物制剂或菌剂或饲料，其包含权利要求1至6中任一项所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌或代谢产物或权利要求10所述的融合蛋白。

15.权利要求1至6中任一项所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌或权利要求7所述的融合基因HA1-DCpep或权利要求10所述的融合蛋白在制备预防和/或治疗H7N9禽流感的药物或菌剂或饲料中的应用。

16.权利要求1至6中任一项所述的表达H7N9禽流感抗原的重组植物乳杆菌或权利要求10所述的融合蛋白或权利要求14所述的药物制剂或菌剂或饲料在如下任意一种中的应用：

1）制备激活机体免疫细胞的产品；

2）制备激活派氏淋巴结DC的产品；

3）制备刺激脾、肠系膜淋巴结和/或派氏淋巴结中的特异性细胞因子的产品；所述特异性细胞因子包括CD4⁺IFN-γ⁺、CD8⁺IFN-γ⁺。