[发明专利]一种淫羊藿的DNA条形码、引物对及其应用

说明书

本发明公开了一种淫羊藿的DNA条形码、引物对及其应用，本发明所提供的箭叶淫羊藿“黔藿1号”的DNA条形码如SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：4所示，所述引物对序列：ITS2序列扩增正向引物：ITS2F:5'‑ATGCGATACTTGGTGTGAAT‑3'，反向引物ITS2R:5'‑GACGCTTCTCCAGACTACAAT‑3'；psbA‑trnH序列扩增正向引物：psbAF:5'‑GTTATGCATGAACGTAATGCTC‑3'；反向引物trnHR:5'‑CGCGCATGGTGGATTCACAATCC‑3'。采用本发明的所鉴定的材料不受地域环境的影响，可以通过一对或多对引物可快速的鉴别目标物种。

技术领域

本发明属于中药材DNA分子鉴定及应用的技术领域，更具体地，涉及对中药材箭叶淫羊藿优良品种“黔藿1号”核糖体上一条基因ITS2和叶绿体上的一条基因psbA-trnH进行PCR扩增并测序，利用两条基因扩增的序列建立“黔藿1号”的条形码。同时，筛选SRAP引物对，建立“黔藿1号”区别于淫羊藿属其他物种的特异性条带。

背景技术

中药材淫羊藿Epimedii folium是小檗科淫羊藿属植物淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥叶，是我国传统大宗药材，其性温、味辛、甘，归肝、肾经，具补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效，临床上主要用于肾阳虚衰、阳痿遗精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛等症。

“黔藿1号”为贵州省非主要农作物和食用菌品种认定专家委员会中药材专业委员会于2021年认定通过的中药材箭叶淫羊藿优良品种，其品质优（叶片总黄酮醇苷含量达到14.8%，是目前发现的淫羊藿属植物中总黄酮醇苷含量最高的一个种）、产量高（以根段茎繁育的种苗在种植2年后田间产量可达到鲜叶360 kg/亩），主要种植于贵州省黔东南、黔南一带。

小檗科淫羊藿属下有41个物种，被历版《中国药典》收载作为中药材淫羊藿的物种仅有淫羊藿、箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿4个，巫山淫羊藿被《中国药典》单独收载。淫羊藿属植物野生资源丰富，在我国分布较广，加之淫羊藿属于我国传统大宗药材且下游开发的产品较多，对淫羊藿药材的需求量大，过去主要靠采挖野生资源为主，导致野生资源濒临灭绝状态，同时，因野生资源杂乱，质量参差不齐，导致下游产品质量不稳定，最终疗效不稳定也是必然。随着我国中医药事业的发展，中医药必将走出国门，对中药材质量的要求不断提高，药材基源可追溯，种苗繁育、种植、采收、加工、包装等环节规范化的文件、政策相应出台并实施。“黔藿1号”属于人工选育出的具备特异性、稳定性和一致性的箭叶淫羊藿优良品种，在加工端如何保证所需原料即为“黔藿1号”仍需要一个可操作、易于实施的技术手段。

为保证中药材箭叶淫羊藿质量稳定、临床疗效可靠，需建立一种可明确箭叶淫羊藿优良品种“黔藿1号”基源的定性鉴别和定量鉴定相结合的方法，以保护“黔藿1号”的真实性。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种淫羊藿“黔藿1号”的DNA条形码、引物对及其应用。

本发明所提供的箭叶淫羊藿“黔藿1号”的DNA条形码，

包含ITS2序列：Composition 104 A; 130 C; 137 G; 114 T; 0 OTHER

Percentage: 21.4% A; 26.8% C; 28.2% G; 23.5% T; 0.0%OTHER