[发明专利]一种枸橼酸爱地那非遗传毒性杂质检测方法

说明书

本申请提供一种检测1类新药枸橼酸爱地那非原料药中遗传毒性杂质SM3(4‑氨基‑1‑甲基‑3‑正丙基吡唑‑5‑甲酰胺)的检测方法，其中使用高效液相色谱‑质谱串联方法对待测样品进行检测。本申请提供的方法能够以超高灵敏度对爱地那非中遗传毒性杂质4‑氨基‑1‑甲基‑3‑正丙基吡唑‑5‑甲酰胺进行有效地测定，从而实施严格的质量控制。

技术领域

本申请涉及药物检测领域，涉及一种枸橼酸爱地那非遗传毒性杂质的检测方法。

背景技术

枸橼酸爱地那非(Aildenafil citrate)，化学名：1-〔3-(6，7-二氢 -1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H-吡唑并[4,3-d]嘧啶-5-基)-4-乙氧基苯磺酰基〕-顺式-3,5-二甲基哌嗪枸橼酸盐(C₂₃H₃₂N₆O₄S·C₆H₈O₇)。枸橼酸爱地那非是枸橼酸西地那非的新型衍生物，是一种5型磷酸二酯酶(Phosphodieseterase 5，PDE5)抑制剂，用于治疗男性勃起功能障碍(ED)。枸橼酸爱地那非是一种治疗ED患者1类新型药物，结构与西地那非类似，具有更好的疗效。

枸橼酸爱地那非遗传毒性杂质杂质A属于遗传毒性杂质，有致畸致癌风险，需要准确的定量方法来控制药品质量。目前，采用常规传统的液相方法检测杂质A，一般检出限在30ppm左右，灵敏度低，达不到控制质量的要求。

因此，本领域存在以提高的灵敏度检测枸橼酸爱地那非遗传毒性杂质A的需求。

发明内容

针对上述问题，本申请提供了一种检测枸橼酸爱地那非原料药中遗传毒性杂质SM3(4-氨基-1-甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺)(杂质A) 的方法。这种方法检测的灵敏度高，可以达到0.2ppm的检出能力。本申请的方法能够准确质控枸橼酸爱地那非原料药中更低含量的遗传毒性杂质杂质A，从而实现药品达到安全、有效、质量可控的目的。

本申请提供一种枸橼酸爱地那非中遗传毒性杂质杂质A的检测方法，用于对该原料药中遗传毒性杂质杂质A进行有效严格的质量控制。

本申请提供一种枸橼酸爱地那非中遗传毒性杂质杂质A的检测方法，采用高效液相色谱-质谱串联(LC-MS)检测，以小粒径十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以流动相A和流动相B的混合液为流动相，通过等度洗脱的方式对待测样品进行检测；所述流动相A为水相，含0.01％甲酸水溶液；流动相B为有机相，甲醇溶液。以加入基质供试品标准曲线法测定原料药中遗传毒性杂质。

本申请中，枸橼酸爱地那非中遗传毒性杂质杂质A(4-氨基-1-甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺)，为：

杂质A(4-氨基-1-甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺)

遗传毒性杂质杂质A，采用常规的普通液相方法测定灵敏度达不到控制质量的要求，检出限在30ppm左右，而采用液相-质谱联用的测定方法可以达到更高的灵敏度，可以达到0.2ppm的检出能力。能够准确质控枸橼酸爱地那非原料药中更低含量的遗传毒性杂质杂质A，从而更好的控制原料药质量，达到药品质量安全的效果。

本申请涉及一种检测枸橼酸爱地那非原料药中SM3(4-氨基-1- 甲基-3-正丙基吡唑-5-甲酰胺)遗传毒性杂质的方法，其包括：

使用高效液相色谱-质谱串联方法对待测样品进行检测，

其中在所述高效液相色谱中，固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为流动相A和流动相B的混合液，所述流动相A为水相溶液，所述流动相B为甲醇溶液，洗脱方式是等度洗脱。

在一个优选的实施方案中，在本申请的检测方法中，在所述高效液相色谱中，其中所述流动相A含0.01％甲酸水溶液；所述流动相A和 B混合总体积计为100％。