[发明专利]DMP蛋白及其编码基因与应用

权利要求书

1.成套蛋白质或成套核酸分子或生物材料在如下任一中的应用：

Q1、构建植物单倍体诱导系；

Q2、植物单倍体育种；

所述成套蛋白质，由蛋白质A和蛋白质B组成；

所述蛋白质A为如下任一：

(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；

(A2)在(A1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接蛋白标签后得到的融合蛋白；

所述蛋白质B为如下任一：

(B1)氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质；

(B2)在(B1)所限定的蛋白质的N端和/或C端连接蛋白标签后得到的融合蛋白；

所述成套核酸分子，由核酸分子A和核酸分子B组成；

所述核酸分子A为能够表达所述蛋白质A的核酸分子；

所述核酸分子B为能够表达所述蛋白质B的核酸分子；

所述生物材料为如下任一：

P1、成套表达盒，由表达盒A和表达盒B组成；所述表达盒A为含有所述核酸分子A的表达盒；所述表达盒B为含有所述核酸分子B的表达盒；

P2、成套重组载体，由重组载体A和重组载体B组成；所述重组载体A为含有所述核酸分子A的重组载体；所述重组载体B为含有所述核酸分子B的重组载体；

P3、成套重组菌，由重组菌A和重组菌B组成；所述重组菌A为含有所述核酸分子A的重组菌；所述重组菌B为含有所述核酸分子B的重组菌；

P4、成套转基因细胞系，由转基因细胞系A和转基因细胞系B组成；所述转基因细胞系A为含有所述核酸分子A的转基因细胞系；所述转基因细胞系B为含有所述核酸分子B的转基因细胞系；

P5、成套sgRNA，由sgRNA分子A和sgRNA分子B组成；所述sgRNA分子A为用于靶向敲除所述核酸分子A的sgRNA分子；所述sgRNA分子B为用于靶向敲除所述核酸分子B的sgRNA分子；

P6、成套CRISPR-Cas9系统，由CRISPR-Cas9系统A和CRISPR-Cas9系统B组成；所述CRISPR-Cas9系统A由P5中所述sgRNA分子A和Cas9蛋白组成；所述CRISPR-Cas9系统B由P5中所述sgRNA分子B和Cas9蛋白组成；

P7、CRISPR-Cas9敲除载体，含有P5中所述sgRNA分子A、所述sgRNA分子B 和Cas9蛋白的编码基因；

所述植物为蒺藜苜蓿。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述核酸分子A为SEQ ID No.3所示的DNA分子；所述核酸分子B为SEQ ID No.4所示的DNA分子。

3.一种构建植物单倍体诱导系的方法，包括如下步骤：对受体植物体内核酸分子A和核酸分子B同时进行抑制表达，得到转基因植物；从所述转基因植物的自交后代或者杂交后代中获得单倍体诱导系；

所述核酸分子A为能够表达蛋白质A的核酸分子；所述核酸分子B为能够表达蛋白质B的核酸分子；

所述蛋白质A为氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；所述蛋白质B为氨基酸序列为SEQID No.2的蛋白质；

所述方法中，对所述受体植物体内所述核酸分子A和所述核酸分子B同时进行抑制表达是采用CRISPR-Cas9技术对所述受体植物体内的所述核酸分子A和所述核酸分子B同时进行敲除；

所述植物为蒺藜苜蓿。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述核酸分子A为SEQ ID No.3所示的DNA分子；所述核酸分子B为SEQ ID No.4所示的DNA分子。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述方法中，是通过向所述受体植物中导入权利要求1中P6所述成套CRISPR-Cas9系统或P7中所述CRISPR-Cas9敲除载体实现的。

6.权利要求3-5中任一所述方法在植物单倍体育种中的应用；

所述植物为蒺藜苜蓿。