[发明专利]DMP蛋白及其编码基因与应用

说明书

本发明公开了DMP蛋白及其编码基因与应用。本发明提供了额成套蛋白质，由蛋白质A(即DMP8)和蛋白质B(即DMP9)组成；所述蛋白质A的氨基酸序列为SEQ ID No.1；所述蛋白质B的氨基酸序列为SEQ ID No.2。本发明通过设计特异性靶向蒺藜苜蓿DMP8和DMP9基因的sgRNA，然后利用CRISPR‑Cas9系统敲除蒺藜苜蓿DMP8和DMP9基因的方法，创造出蒺藜苜蓿单倍体诱导体系。本发明对于豆科植物单倍体育种具有重要意义，可有效缩短育种年限。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及DMP蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

单倍体育种已经成为培育植物新品种的重要方法之一，与此同时提高单倍体诱导率和简化单倍体诱导程序是单倍体育种技术的关键步骤。随着单倍体诱导技术的发展与改进，单倍体育种技术已经被广泛应用于许多重要农作物的育种研究中，展现出基因快速纯合、育种年限缩短、育种效率高等优势。豆科植物是重要的经济作物，目前尚未开发体内单倍体诱导体系，若能实现单倍体育种，在农业生产中将会有广泛的应用前景。蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)作为豆科的模式植物，具有豆科植物的普遍特征，因此，研究蒺藜苜蓿单倍体诱导，进而开发适用于豆科的体内单倍体诱导体系具有重要的应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供DMP蛋白及其编码基因与应用。

第一方面，本发明要求保护一种成套蛋白质。

本发明要求保护的成套蛋白质由蛋白质A和蛋白质B组成。所述蛋白质A和所述蛋白质B均来自于蒺藜苜蓿，分别命名为DMP8和DMP9。

所述蛋白质A(即DMP8)可为如下任一：

(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；

(A2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；

(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接蛋白标签后得到的融合蛋白。

所述蛋白质B(即DMP9)可为如下任一：

(B1)氨基酸序列为SEQ ID No.2的蛋白质；

(B2)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

(B3)与(B1)-(B2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同一性且具有相同功能的蛋白质；

(B4)在(B1)-(B3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接蛋白标签后得到的融合蛋白。

上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述蛋白质中，所述标签(tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。