[发明专利]与小麦旗叶宽主效QTL连锁的KASP-Flw-sau6198分子标记及其应用有效
| 申请号： | 202111227415.9 | 申请日： | 2021-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN113817862B | 公开（公告）日： | 2022-07-01 |
| 发明（设计）人： | 马建;王健;赵聪豪;王素容;曾照勇;刘航;唐华苹;牟杨;邓梅;苟璐璐;谭翠;江千涛;魏育明;郑有良;兰秀锦 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 张换君 |
| 地址： | 611130 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小麦 旗叶宽主效 qtl 连锁 kasp flw sau6198 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种与QTL QFLW.sau-AM-4B.4连锁的KASP-Flw-sau6198分子标记，其特征在于，所述分子标记为SNP分子标记，多态性为A/G，其与小麦旗叶宽QTL QFLW.sau-AM-4B.4共定位于四倍体小麦4B染色体长臂上，且位于QTL QFLW.sau-AM-4B.4区间内；所述分子标记通过如SEQ ID NO：1-3所示的引物组合物扩增得到。
2.一种引物组合物，其特征在于，包括如SEQ ID NO：1-2所示的两条特异性引物和如SEQ ID NO：3所示的通用引物，所述引物组合用于扩增权利要求1所述KASP-Flw-sau6198分子标记。
3.一种鉴定小麦基因或其基因片段的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求2所述的引物组合物。
4.一种小麦旗叶宽QTL QFLW.sau-AM-4B.4或小麦KASP-Flw-sau6198分子标记在调控小麦旗叶宽性状中的应用。
5.一种如权利要求1所述的KASP-Flw-sau6198分子标记或权利要求2所述的引物组合物或权利要求3所述的试剂盒的应用，其特征在于，用于小麦旗叶宽基因遗传分析和精细定位中。
6.一种筛选含有旗叶宽QTL QFLW.sau-AM-4B.4的小麦株系方法，其特征在于，包括以下步骤：以待测植物样品的基因组DNA为模板，利用权利要求2所述的引物组合物进行荧光定量PCR扩增，根据所得扩增产物的荧光检测结果基因型分型，将检测到与较宽旗叶母本一致的荧光的植株基因型记为A，为较宽旗叶型株系，同较窄旗叶父本一致的荧光的植株基因型记为B，为较窄旗叶型株系，进而筛选出含有旗叶宽QTL QFLW.sau-AM-4B.4的小麦株系。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，荧光定量PCR反应体系包括：10μL MasterMix、混合引物2.8μL、10ng模板DNA、双蒸水加至总量为20μL；其中，所述混合引物是由SEQID No：1-SEQ ID No：3所示的三条引物按照10ng/μL的浓度分别加入150μL，150μL和350μL，并添加ddH2O 450μL进行混合而成。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述荧光定量PCR的反应程序包括：94℃预变性12min；94℃变性20s、59℃复性/延伸55s，共10个循环；94℃变性20s、56℃复性/延伸65s，共30个循环；完成后进行荧光读值。
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