[发明专利]一种用于甲状腺癌检测的标志物及应用、制备及检测方法

说明书

本发明公开了一种用于甲状腺癌检测的标志物，包括由抗体包被的磁微粒、吖啶酯标记的抗体、校准品、激发液A、激发液B、浓缩洗涤液。

技术领域

本发明属于肿瘤的诊断领域，尤其是一种用于甲状腺癌检测的标志物、制备方法以及检测方法。

背景技术

肿瘤是一类严重威胁人类健康的疾病，具有高发病率和高死亡率的特点。2020年至2015年，我国癌症患病人数与死亡人数呈上升趋势，其中新发与死亡病例分别提升了16.3％与28.4％，是当前危害我国居民健康的最主要疾病之一。

甲状腺癌是临床上最为常见的一种甲状腺恶性肿瘤，近些年，该类疾病的发病率一直呈现逐年上升的趋势。在恶性肿瘤中，甲状腺癌发病率排第七位。

目前临床上对于甲状腺癌的诊断包括CT检查、超声检查等影像学手段，但CT检查、超声检查等影像学手段存在技术上的缺点，灵敏度低，容易产生误诊，这主要原因是由于甲状腺癌良性与恶性之间的临床表现没有显著的差异，且大部分患者的症状、体征也无特异性，发病较慢且隐匿。

发明内容

本发明提供一种用于甲状腺癌检测的标志物、制备方法以及检测方法。

为解决上述技术问题，本发明提供一种用于甲状腺癌检测的标志物，其特征在于：包括由抗体包被的磁微粒、吖啶酯标记的抗体、校准品、激发液A、激发液B、浓缩洗涤液。

作为对本发明给出的一种用于甲状腺癌检测的标志物的改进，抗体包被的磁微粒含有鼠抗PCT抗体包被的磁珠、鼠抗甲状腺球蛋白抗体包被的磁珠、鼠抗Galectin-3抗体包被的磁珠、鼠抗CEA抗体包被的磁珠。

作为对本发明给出的一种用于甲状腺癌检测的标志物的进一步改进，吖啶酯标记的抗体含有吖啶酯标记的鼠抗PCT抗体、吖啶酯标记的鼠抗甲状腺球蛋白抗体、吖啶酯标记的鼠抗Galectin-3抗体、吖啶酯标记的鼠抗CEA抗体。

作为对本发明给出的一种用于甲状腺癌检测的标志物的进一步改进，校准品不同浓度的PCT、甲状腺球蛋白、Galectin-3、CEA纯品。

作为对本发明给出的一种用于甲状腺癌检测的标志物的进一步改进，激发液A为0.5％的H₂O₂溶液和0.1mol/LHNO₃溶液。

作为对本发明给出的一种用于甲状腺癌检测的标志物的进一步改进，激发液B为0.35mmol/L的NaOH溶液和3％Triton X-100溶液。

作为对本发明给出的一种用于甲状腺癌检测的标志物的进一步改进，浓缩洗涤液为含有Tween-20的PBS缓冲液，pH7.0-8.0。

所述一种用于甲状腺癌检测的标志物在甲状腺癌检测试剂盒中的应用。

本发明给出一种用于甲状腺癌检测的标志物的制备方法，磁微粒包被抗体：取磁微粒用EDC溶液活化后，加入抗体进行分子偶联；再用含牛血清白蛋白的0.0.1mol/L磷酸盐缓冲液pH7.4进行封闭；将封闭后的磁微粒置于2～8℃保存备用；吖啶酯的标记：将吖啶酯加入抗体溶液中，混匀，避光孵育；将反应液全部透析至0.02mol/L磷酸盐缓冲液pH 7.4中，于–20℃避光保存；校准品的配制：用标准品缓冲液将标准抗原配制成不同浓度的溶液。