[发明专利]一种系统性红斑狼疮并动脉粥样硬化动物模型构建方法

说明书

本发明公开了一种系统性红斑狼疮并动脉粥样硬化小鼠模型的构建方法。选取LDL‑/‑小鼠腹腔注射pristane，高脂喂养14周，根据小鼠毛发变化及检验血清狼疮抗体水平及主动脉病理变化评估模型效果。该方法简单易行，系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化发生率高，造模时间较短，接近临床系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化的病理生理变化。

技术领域

本发明涉及医学技术领域，特别涉及系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化小鼠模型及其构建方法。

背景技术

随着诊断及治疗技术的不断提高，系统性红斑狼疮(SLE）5、10年生存率已大大的提高，但远期生存率仍无明显改观，研究发现其主要原因是动脉粥样硬化所致心脑血管并发症明显影响患者预后。进一步明确SLE早发及高发动脉粥样硬化的机制，以早期干预提高远期生存率是十分必要的。但受动物模型限制，目前关于系统性红斑狼疮早发动脉粥样硬化的研究大多为临床研究，在动物上开展的基础研究还较少。因此，制备系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化的动物模型用于该疾病的病理生理及治疗的研究是必要的。

目前制作系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化动物模型的方法较少，耗时较长，过程繁琐。有学者报道其动物模型制备方法;首先将动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠和系统性红斑狼疮Fasl-/-小鼠杂交得到F1代ApoE+/- Fasl+/-小鼠，然后通过F1代小鼠杂交通过基因鉴定筛选出F2代的ApoE-/- Fasl-/-小鼠即为构造的小鼠模型。这种方法构建的动物模型过程繁琐，耗时较长，模型成功率较低。亦有学者通过给ApoE-/-小鼠体内注射降植烷（pristne），高脂喂养6-8个月可构建小鼠模型，耗时长且ApoE-/-小鼠蛋白谱与人类不够相近。

综上所述，当前用于构建系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化动物模型的方法不够稳定可靠，因此亟需一种更为简易理想的造模方法用于后续的研究。

发明内容

针对上述的不足，本发明提供了一种新的系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化动物模型的构建方法。该方法更为简易，耗时较短，病理生理状态与临床更为接近。

为了实现上述发明目的，本发明提供以及技术方案：

本发明提供了一种系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化动物模型的构建方法，包括以下几个步骤：

步骤（1）将降植烷（pristane）导入LDL-/-小鼠腹腔；

步骤（2）SPF级动物房内高脂喂养14周。

LDL-/-小鼠对脂肪和胆固醇都非常敏感，给予高脂饲料喂养适宜的时长，动脉粥样硬化可以发展到纤维化斑块或者纤维帽阶段，因此，可以模拟人类动脉粥样硬化的所有阶段，且其蛋白谱与ApoE-/-小鼠相比较，与人类的更为接近，有利于将脂蛋白改变与人类动脉粥样硬化与高脂血症的关系进行推演。

降植烷（Pristane），通过线粒体损伤途径诱发细胞凋亡产生核抗原，引起T、B淋巴细胞活化反应性增高，产生多种抗体，启动自身免疫，引起炎症反应，从而诱导狼疮的发生，从而使动物模型产生与临床相似的病理生理状态。本发明采用LDL-/-注射pristane的方法能够成功构建系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化动物模型，此模型能应用于各种相关研究。

作为优选，本发明 LDL-/-小鼠为10周龄，雌性。

作为优选，步骤（1）pristane导入剂量为0.5ml。

作为优选，步骤（2）所用高脂饲料配方为：普通饲料+21%猪油(Wt/Wt) +0.15%(Wt/Wt)胆固醇，喂养时间持续为14周。

作为优选，系统性红斑狼疮并发动脉粥样硬化动物模型的构建方法，其特征在于，所述步骤（3）中，监测动物模型发病状况的方法为：对小鼠进行眼眶取血分离血清，ELISA检测小鼠血清中自身抗体水平。