[发明专利]一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法有效
申请号: | 202111232308.5 | 申请日: | 2021-10-22 |
公开(公告)号: | CN113832135B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 王俊峰;张慧君;张鹏鹏;潘建泽 | 申请(专利权)人: | 江苏奕农生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N11/082 | 分类号: | C12N11/082;C12N9/02;C02F3/34;B01D67/00;B01D69/02;C02F101/34 |
代理公司: | 无锡智麦知识产权代理事务所(普通合伙) 32492 | 代理人: | 王普慧 |
地址: | 223600 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 改性 聚丙烯 微孔 固定 化漆酶 方法 | ||
1.一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)固定化漆酶载体的制备;
(2)漆酶的固定化;
其中,固定化漆酶载体的制备包括如下步骤:S1、聚丙烯微孔膜的预处理:将聚丙烯微孔膜置于正丁醇溶剂中进行浸泡,随后取出并用去离子水洗涤多次,自然晾干,备用;
S2、聚丙烯微孔膜的溶剂改性:将步骤S1预处理得到的聚丙烯微孔膜置于混合溶剂中进行浸泡,浸泡完成后取出,然后用去离子水洗涤多次,自然晾干,备用;
S3、聚丙烯微孔膜的二次改性:将步骤S2中溶剂改性后的聚丙烯微孔膜置于容器中,利用氢氧化铝胶体进行涂覆;
S4、多巴胺的表面沉积:将步骤S3中涂覆完成后的聚丙烯微孔膜置于含多巴胺的缓冲液中,振荡反应,反应完成后经过洗涤、干燥处理,即得固定化漆酶载体;
其中,步骤S2中混合溶剂由质量比为100:5的去离子水、N,N二甲基乙酰胺混合得到;
其中,步骤(2)中漆酶的固定化包括如下步骤:将0.5g制备得到的固定化漆酶载体置于反应瓶中,随后加入1.5mLpH为5.5的含漆酶的醋酸醋酸钠缓冲液,室温下震荡4h,振荡完成后,用醋酸醋酸钠缓冲液洗涤,最后经水洗,保存备用;其中,漆酶的浓度为0.6mg/mL。
2.根据权利要求1所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S1中浸泡时间为3~10min。
3.根据权利要求1所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S2中浸泡温度为室温,浸泡时间为0.5~2d。
4.根据权利要求1所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S3中涂覆的具体操作包括如下步骤:将溶剂改性后的聚丙烯微孔膜置于容器中,并与氢氧化铝胶体流向平行,随后利用配制好的氢氧化铝胶体对聚丙烯微孔膜进行涂覆。
5.根据权利要求4所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S3中氢氧化铝胶体的pH值为7.0,铝离子的浓度为0.035mol/L。
6.根据权利要求5所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S3中涂覆温度为25℃,涂覆时间为3~10min。
7.根据权利要求1所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S4中缓冲液为pH=8.0的Tris缓冲液,多巴胺的浓度为2mg/mL。
8.根据权利要求7所述的一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,其特征在于,步骤S4中振荡反应温度为室温,振荡反应时间为8~24h。
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