[发明专利]一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法有效
申请号: | 202111232308.5 | 申请日: | 2021-10-22 |
公开(公告)号: | CN113832135B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 王俊峰;张慧君;张鹏鹏;潘建泽 | 申请(专利权)人: | 江苏奕农生物股份有限公司 |
主分类号: | C12N11/082 | 分类号: | C12N11/082;C12N9/02;C02F3/34;B01D67/00;B01D69/02;C02F101/34 |
代理公司: | 无锡智麦知识产权代理事务所(普通合伙) 32492 | 代理人: | 王普慧 |
地址: | 223600 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 改性 聚丙烯 微孔 固定 化漆酶 方法 | ||
本发明公开了一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法。所述方法中,先对聚丙烯微孔膜进行正丁醇浸泡,初步提高表面的亲水性;接着用混合溶剂对膜进行浸泡,再次提高膜的亲水性,并同时提高膜的表面平整性;随后用氢氧化铝胶体进行涂覆,使得氢氧化铝胶体牢固地均匀涂覆在膜表面;最后,通过多巴胺与胶体的紧密键合,实现多巴胺的高效沉积,起到固定化漆酶的作用。本发明制备得到的改性聚丙烯微孔膜的接触角小,亲水性好;以改性聚丙烯微孔膜为载体得到的固定化漆酶稳定性好、酶固化量高,对含酚废水的降解吸附效果好,具有良好的应用前景。
技术领域
本发明属于漆酶固定化技术领域,具体涉及一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法。
背景技术
漆酶属于蓝色氧化酶,自19世纪发现以来已被广泛应用于生化环材等技术领域。由于自由漆酶在使用过程中存在着不耐酸碱、不耐高温等不足,漆酶固定化技术得到了广泛发展和应用。
经过长期发展,目前漆酶的固定化方法丰富多样,包括化学法、物理法、包埋法及自固定法等。在各种方法中,通常离不开固定化载体的使用;由于具有结构和功能上的可调性,膜作为载体用于漆酶固定化已得到诸多研究。如专利文献CN101671665A报道了一种电放纤维膜固定化漆酶的方法,包括载酶电纺纤维膜的制备和膜固定交联漆酶两个步骤,整个工艺复杂,且酶活性回收率波动大,最高仅为82.8%;专利文献CCN107034207A制备了一种无机杂化膜用于漆酶的固定,对刚果红染料的脱色能够达到90%以上,但是并未考虑成分更为复杂的含酚废水的处理效果;专利文献CN109012219A报道了一种原位固定漆酶超滤膜的制备方法,固定化漆酶在20℃~60℃时相对酶活仅为64.7%,对含酚废水去除率也仅为78.4~81.5%。因此,开发一种制备方法简单、固定化酶稳定性好且活性高的漆酶膜载体十分必要。
发明内容
针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,通过对微孔膜的改性,改善膜表面的亲水性和平整性,高效接枝多巴胺,实现漆酶的高效固定,稳定性好且对含酚废水的降解吸附能力好。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种改性聚丙烯微孔膜固定化漆酶的方法,包括如下步骤:
(1)固定化漆酶载体的制备;
(2)漆酶的固定化;
其中,固定化漆酶载体的制备包括如下步骤:
S1、聚丙烯微孔膜的预处理:将聚丙烯微孔膜置于正丁醇溶剂中进行浸泡,随后取出并用去离子水洗涤多次,自然晾干,备用;
S2、聚丙烯微孔膜的溶剂改性:将步骤S1预处理得到的聚丙烯微孔膜置于混合溶剂中进行浸泡,浸泡完成后取出,然后用去离子水洗涤多次,自然晾干,备用;
S3、聚丙烯微孔膜的二次改性:将步骤S2中溶剂改性后的聚丙烯微孔膜置于容器中,利用氢氧化铝胶体进行涂覆;
S4、多巴胺的表面沉积:将步骤S3中涂覆完成后的聚丙烯微孔膜置于含多巴胺的缓冲液中,振荡反应,反应完成后经过洗涤、干燥处理,即得固定化漆酶载体。
优选地,步骤S1中浸泡时间为3~10min。
优选地,步骤S2中混合溶剂由质量比为100:5的去离子水、N,N-二甲基乙酰胺混合得到。
优选地,步骤S2中浸泡温度为室温,浸泡时间为0.5~2d。
优选地,步骤S3中涂覆的具体操作包括如下步骤:将溶剂改性后的聚丙烯微孔膜置于容器中,并与氢氧化铝胶体流向平行,随后利用配制好的氢氧化铝胶体对聚丙烯微孔膜进行涂覆。
优选地,步骤S3中氢氧化铝胶体的pH值为7.0,铝离子的浓度为0.035mol/L。
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