[发明专利]检测南葶苈子配方颗粒超高效液相色谱特征图谱的方法

权利要求书

1.一种检测南葶苈子配方颗粒的UPLC特征图谱的方法，所述方法采用超高效液相色谱仪进行分析，色谱条件如下：

色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，

流动相：以乙腈为流动相A，以0.02～0.10％三氟乙酸水溶液，优选0.1％三氟乙酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱；

流速：每分钟0.20～0.40ml；优选每分钟0.30ml；

柱温：20～35℃；优选30℃；

检测波长：203～360nm；优选254nm；

进样量：2μl。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，梯度洗脱条件为：0～3min，流动相A的体积分数为9％，流动相B的体积分数为91％；3～21min，流动相A的体积分数变化为9→18％，流动相B的体积分数为91→82％；21～30min，流动相A的体积分数变化为18→33％，流动相B的体积分数为82→67％。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，色谱柱为Waters ACQUITYHSS T3，1.8μm，2.1×100mm。

4.根据权利要求1所述的方法，其包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：

取南葶苈子配方颗粒粉末置具塞容器中，精密加入溶剂，称重后超声处理，放冷，再称定重量，用溶剂补足减失的重量，离心，取续滤液，即得南葶苈子配方颗粒样品溶液；

(2)超高效液相色谱分析：

使用上述色谱分析条件将供试品溶液注入超高效液相色谱分析仪进行测定，得到特征图谱。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，供试品溶液的制备中，

所述溶剂为以甲醇体积百分比计0～100％的甲醇水溶液，优选为25％甲醇水溶液；

南葶苈子配方颗粒粉末与溶剂的质量体积比为1:125g/mL。

6.根据权利要求4所述的方法，其中，供试品溶液的制备如下进行：取南葶苈子配方颗粒粉末0.2g，精密加入25％甲醇水溶液25ml，称定重量，超声10～30分钟，放冷，再称定重量，用25％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得南葶苈子配方颗粒供试品溶液；

特别地，供试品溶液的制备如下进行：取南葶苈子配方颗粒适量，研细，取约0.2g，精密称定，置具塞容器中，精密加入25％甲醇水溶液25ml，称定重量，以频率37kHz，功率1130W进行超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用25％甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，12000rpm离心10分钟，滤过，取续滤液，即得南葶苈子配方颗粒样品溶液。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所得到的南葶苈子配方颗粒UPLC特征图谱具有共有峰10个，保留时间分别为1号峰5.003min、2号峰6.814min、3号峰7.361min、4号峰7.717min、5号峰8.485min、6号峰11.120min、7号峰12.966min、8号峰15.322min、9号峰19.174min、10号峰23.765min；

特别地，以峰1为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，相对保留时间规定值为：1.00(峰1)、1.35(峰2)、1.46(峰3)、1.53(峰4)、1.68(峰5)、2.20(峰6)、2.57(峰7)、3.03(峰8)、3.79(峰9)、4.70(峰10)。

8.一种建立南葶苈子配方颗粒的对照图谱的方法，所述方法包括：

制备10个以上的供试品溶液；

按照根据权利要求1所述的检测南葶苈子配方颗粒的UPLC特征图谱的方法对所述10个以上供试品溶液分别进行检测得到南葶苈子配方颗粒的10个以上的UPLC特征图谱；

通过将得到的南葶苈子配方颗粒的UPLC特征图谱导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”来建立南葶苈子配方颗粒的对照图谱。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所得南葶苈子配方颗粒的对照图谱大体上如图32所示。

10.一种检测南葶苈子配方颗粒产品质量的方法，其包括：

(1)使用根据本发明的检测南葶苈子配方颗粒的UPLC特征图谱的方法检测南葶苈子配方颗粒得到南葶苈子配方颗粒的特征图谱；

(2)将所得南葶苈子配方颗粒的特征图谱与对照图谱进行对比，若南葶苈子配方颗粒特征图谱中含有所建对照图谱中相对应的10个特征峰，则判定该南葶苈子配方颗粒在特征图谱这一质量检测项目上合格。