[发明专利]一种具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的三萜类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种三萜类化合物，从华褐孔菌的子实体中分离得到式I和式II所示的两个三萜类化合物，这两个化合物具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性，可作为潜在的治疗阿尔茨海默病药物或先导化合物的开发应用。本发明还提供了一种三萜类化合物的制备方法和应用。

技术领域

本发明属于天然药物技术领域，尤其涉及一种具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的三萜类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

阿尔茨海默病(AD)是一种多层面的神经退行性疾病，具体表现为记忆力减退，认知能力逐渐减退，严重行为异常。据悉，全世界大约有4680万人患有AD。随着全球人口的老龄化，预计到2050年这个数字将增加两倍。AD的发病机制涉及多种途径，包括碱能神经递质缺乏，β-淀粉样蛋白(Aβ)和Tau蛋白磷酸化途径。最近公布的Aβ聚集抑制剂或者tau蛋白聚集抑制剂疗法已宣告失败，而通过增加乙酰胆碱(ACh)的水平来增强脑胆碱能神经传递是目前治疗AD最有效的方法。脑内的乙酰胆碱主要被胆碱酯酶(ChE)水解，因此抑制ChE已被证明是一种有效的方法。神经系统中有两种ChE：乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BChE)。目前，FDA已批准了四种乙酰胆碱酯酶抑制剂，包括他克林，多奈哌齐，加兰他明和利瓦斯替明。这些乙酰胆碱酯酶抑制剂能够改善AD患者的记忆和认知功能，但他克林因其肝毒性于2013年在美国退出临床实验，其他三种抑制剂等也未能治愈AD或阻止病情的进展。研究表明，BChE对AChE具有补偿功能，AChE/BchE双靶点抑制剂是一种非常具有发展前景的治疗AD策略。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的三萜类化合物及其制备方法和应用，本发明提供的三萜类化合物具有良好的乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性。

本发明提供了一种具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的三萜类化合物，包括：式I结构化合物和/或式II结构化合物：

本发明提供了一种上述技术方案所述的具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的三萜类化合物的制备方法，包括：

将桦褐孔菌子实体进行浸提，得到浸膏；

将所述浸膏进行萃取，得到提取物；

将所述提取物进行梯度洗脱，得到流份；

将所述流份进行展开，得到具有显著乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的三萜类化合物。

优选的，所述浸提过程中的浸提液为乙醇水溶液。

优选的，所述萃取包括：

依次采用石油醚和乙酸乙酯进行萃取。

优选的，所述梯度洗脱包括：

将所述提取物通过减压正相硅胶柱以石油醚-乙酸乙酯进行第一梯度洗脱，得到28个流份；

将第19个流份经C18反相硅胶柱以甲醇-水进行第二梯度洗脱，得到32个流份；

将第23个流份经正相硅胶柱以石油醚-氯仿-乙酸乙酯进行第三梯度洗脱，得到4个流份。

6、根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述展开包括：

将第三梯度洗脱后得到的第3个流份经制备TLC以石油醚-氯仿-异丙醇展开，得到式I结构化合物。

优选的，所述梯度洗脱包括：

将第一梯度洗脱后得到的第11个流份经C18反相硅胶柱以甲醇-水进行第四梯度洗脱，得到33个流份；

将第27个流份经硅胶柱以石油醚-乙酸乙酯进行第五梯度洗脱，得到24个流份；