[发明专利]一种人参素提取用复合蛋白酶、制备方法及其应用工艺在审
申请号: | 202111239832.5 | 申请日: | 2021-10-25 |
公开(公告)号: | CN113913409A | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
发明(设计)人: | 汤立民;王翠玉;任素琴 | 申请(专利权)人: | 抚松县安东参业有限公司 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N9/26;C12N9/50;C12N9/64;C12N9/76;C12N9/24;C12N9/18;C12N9/88;C12P33/20;C12P21/06;C12P19/14;C12P19/04;C12P19/00;C12P13/00 |
代理公司: | 北京众泽信达知识产权代理事务所(普通合伙) 11701 | 代理人: | 周振 |
地址: | 134506 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 人参 提取 复合 蛋白酶 制备 方法 及其 应用 工艺 | ||
1.一种人参素提取用复合蛋白酶,其特征在于,按重量百分比计,由下述物质组成:纤维素酶10~30%、淀粉酶20~25%、果胶酶10~20%、混合酶20~30%、海藻酸钠1%、复合稳定剂6%、复合链引发剂1~3%及5%碳酸氢钠水溶液若干,其中,所述混合酶包括:中性蛋白酶2~5%、木瓜蛋白酶1%、碱性蛋白酶1~3%、胃蛋白酶5~8%和胰蛋白酶5~8%。
2.如权利要求1所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法,其特征在于:包括以下步骤,
(1)按比例称取一定量的各原料;
(2)预混:将纤维素酶、淀粉酶及果胶酶混合均匀备用,记为混合物一;将中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶混合均匀备用,记为混合物二;
(3)分级处理:混合物一中加入高于其总质量5倍的水,搅拌均匀后于25℃下加入1%的海藻酸钠及3%的复合稳定剂,高速搅拌备用;混合物二中加入高于其总质量3倍的水,搅拌均匀后于25℃下加入1~3%的复合链引发剂及3%的复合稳定剂,高速搅拌备用;
(4)混合反应:将上述分级处理后的两份产物加入至高剪切乳化机中,加入PH调节剂调节至PH=5~7,常温下以12000~16000r/min转速反应3h后过滤烘干即得。
3.如权利要求2所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法,其特征在于:复合稳定剂为浓度为0.15mol/l的聚乙烯醇。
4.如权利要求2或3所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法,其特征在于:复合链引发剂为氯化钙。
5.如权利要求4所述的人参素提取用复合蛋白酶的制备方法,其特征在于:PH调节剂为碳酸氢钠。
6.如权利要求1所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺,其特征在于:包括以下步骤,
(1)人参预处理:将干人参通过粉碎机进行粉碎,获得粒径范围在300~3000微米的人参提取样,密封于0~5℃的低温环境下保存备用;
(2)首次提取:取出人参提取样,加入其质量15倍的纯化水,搅拌15min后加入复合蛋白酶,50℃搅拌1.5h后通过活性炭柱,收集流出液A;
(3)二次提取:流出液A重复加入至搅拌腔中,保持搅拌,升温至90℃后通电,5V电离反应15~20min,通过非极性大孔树脂柱,收集流出液B;
(4)三次提取:流出液B重复加入至搅拌腔中,降温至50~55℃,保温搅拌2~3h,过滤,收集流出液C;
(5)灭酶:高温进行灭酶操作;
(6)水提取:20%乙醇加热回流流出液C三次,第一次2小时,第二、三次各1小时,回流液和残余流出液C合并得到提取液,并旋干提取液,回收乙醇;
(7)过滤:旋干的提取液中加入纯化水,搅拌溶解后过滤,收集滤渣和滤液;
(8)浓缩、干燥:滤液旋干,收集旋干物,与滤渣合并于50℃下干燥24h以上即得人参素。
7.根据权利要求6所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺,其特征在于:人参预处理步骤中,将粉碎后的人参提取样浸泡于0.5mol/l的氯化钠溶液中,并抽真空,密封于0~5℃的低温环境下保存备用;其中,氯化钠溶液的质量为人参提取样的5~8倍,浸泡时间不低于15h。
8.根据权利要求7所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺,其特征在于:首次提取操作中,搅拌速率为60r/s,二次提取操作中,搅拌速率为100~120r/s,三次提取操作中,搅拌速率为80~100r/s。
9.根据权利要求8所述的人参素提取用复合蛋白酶的应用工艺,其特征在于:首次提取、二次提取及三次提取操作中,均通过5%碳酸氢钠水溶液调节PH至6~7。
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