[发明专利]植物细胞转基因纳米载体的制备和应用在审
申请号: | 202111242463.5 | 申请日: | 2021-10-25 |
公开(公告)号: | CN113913453A | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
发明(设计)人: | 陆新华;孙德权;张秀梅;胡会刚 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 许佳 |
地址: | 524091 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 植物 细胞 转基因 纳米 载体 制备 应用 | ||
1.一种植物细胞转基因纳米载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将十六烷基三甲基溴化铵溶于超纯水中,调节pH,升温剧烈搅拌后,冷却;逐滴加入正硅酸乙酯,搅拌反应,保温,得反应液;
(2)将所述反应液过滤,固体产物分散于含有氯化氢的酒精中,搅拌条件下水浴,之后离心,固体产物洗涤,干燥,得到介孔硅纳米粒;
(3)将所述介孔硅纳米粒分散在乙醇中,超声均匀后,剧烈搅拌,然后逐滴加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷反应,之后加超纯水,剧烈搅拌继续反应,离心,洗涤,干燥,得到氨基化硅纳米粒,即为植物细胞转基因纳米载体。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述调节pH具体为采用氨水调节pH至10;所述升温剧烈搅拌具体为80℃剧烈搅拌30min;所述冷却为冷却至30℃。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述搅拌反应的时间为24h;所述保温为80℃烘箱中保温24h。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述过滤采用硝酸纤维素膜过滤,所述硝酸纤维素膜的孔径为0.1μm;所述含有氯化氢的酒精的配制方法为将1mL氯化氢溶液加入到100mL酒精中,所述氯化氢溶液的质量浓度为32%。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述水浴的温度为60℃;所述离心为9000rpm离心10min;所述干燥为真空干燥12h。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在步骤(1)中,剧烈搅拌过程中,还加入1,3,5-三甲苯。
7.一种权利要求1-6任一项所述的植物细胞转基因纳米载体的制备方法制备得到的植物细胞转基因纳米载体。
8.一种权利要求7所述的植物细胞转基因纳米载体作为植物基因载体的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述植物细胞转基因纳米载体用于负载质粒DNA对原生质体进行细胞转导。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述原生质体为拟南芥原生质体。
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