[发明专利]一种非诊断目的双抗夹心酶联免疫检测蜡样芽胞杆菌的方法

权利要求书

1.一种非诊断目的双抗夹心酶联免疫检测蜡样芽胞杆菌的方法，其特征在于，以模拟酶标二抗作为酶标二抗，所述二抗为羊抗兔IgG，以抗蜡样芽胞杆菌的单克隆抗体作为包被抗体，以抗蜡样芽胞杆菌的多克隆抗体作为检测抗体，所述模拟酶标二抗以Cu/CeO₂纳米颗粒与二抗偶联，所述Cu/CeO₂纳米颗粒按照如下方法进行制备：Ce(NO₃)₃•6H₂O、CuCl₂•2H₂O和PVP的乙二醇溶液进行水热反应，得到前驱体，所述水热反应的条件为160℃，8h；前驱体煅烧即得，所述煅烧反应的条件为300℃，2h；以质量计算，Ce(NO₃)₃•6H₂O、CuCl₂•2H₂O和PVP的用量比为434：10：300，反应体系的pH为4.0；以体积比为1:1的TMB和H₂O₂的混合液为显色液，显色反应温度为35℃， pH为4，TMB浓度为25mM，H₂O₂浓度为10mM，反应时间为8min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包被抗体包被浓度为1.25～10.0 μg/mL，并且检测抗体浓度为0.5～16 μg/mL。

3.一种双抗夹心酶联免疫检测蜡样芽胞杆菌的试剂盒，其特征在于，含权利要求1中所述的模拟酶标二抗、抗蜡样芽胞杆菌的单克隆抗体、和抗蜡样芽胞杆菌的多克隆抗体，还含有显色液，以体积比为1:1的TMB和H₂O₂的混合液为显色液，pH为4，TMB浓度为25mM，H₂O₂浓度为10mM。