[发明专利]一种从甜叶菊中提取莱鲍迪苷A、甜菊苷和甜菊多酚的方法及其应用

说明书

本发明公开了一种从甜叶菊中提取莱鲍迪苷A、甜菊苷和甜菊多酚的方法及其应用，提取方法包括，向热水浸提甜叶菊粉末后得到的浸提液中加入饱和石灰水调节pH，静置沉淀后，离心分离；将离心后的上清液进行后处理得到甜菊糖苷粗品，随后加入正丙醇后加热并趁热过滤，分别纯化滤液和滤饼得到甜菊苷和莱鲍迪苷A；将离心后的沉淀加稀盐酸溶解并调pH后离心，取上清液用聚酰胺树脂纯化得到甜菊多酚。本发明通过利用莱鲍迪苷A和甜菊苷在正丙醇里面具有不同溶解性的特点，能高效率分离甜菊糖苷里面的两个主要成分；采用80％以上纯度的莱鲍迪苷A粗品进行结晶能缩短纯化时间，避免直接结晶时莱鲍迪苷A部分溶解于母液而未能使其充分析出，且能得到含量在95％以上的甜菊苷。

技术领域

本发明涉及植物有效成分的提取技术领域，更具体地，涉及一种从甜叶菊中提取莱鲍迪苷A、甜菊苷和甜菊多酚的方法及其应用。

背景技术

随着蔗糖消费量的增加所导致的严重的健康问题，低卡路里的甜味剂越来越受到消费者们的推崇。

甜菊糖苷是富含于甜叶菊(Stevia reabudiana Bertoni)茎叶中的一组甜味物质，其主要成分为莱鲍迪苷A(RA)和甜菊苷(STV)，约占甜菊糖苷的90wt％。甜菊糖苷安全无毒、理化性质稳定，是一类高甜度、低热值的甜味剂，在满足甜味需求的同时还可以减少糖尿病、肥胖症的发生率，起到肾保护及促进口腔健康的作用。除了作为天然甜味剂的显著优势外，STV和RA还具有降血糖、促进胰岛素和胰高血糖素分泌、降低血压和增强免疫等作用，并且在酿酒、饮料、化工和医药等行业也有着广泛的应用。

由于STV和RA具有相同的苷元，RA在C13位上的氧苷键上比 STV多一个葡萄糖基，其结构和极性也非常接近，给分离工作带来了一定的难度。

现有技术中，甜菊糖苷普遍采用的分离纯化方法主要包括：重结晶法、柱层析法、制备色谱法、分子印迹法和高速逆流色谱法。

公开号为CN111777652A的中国发明专利申请公开了一种从甜叶菊中提取甜菊苷和莱鲍迪苷A的方法，该方法使用1，2-丙二醇、甘油和水组成的天然低共熔溶剂对甜叶菊进行提取，该法相比较于水提和醇提，能大大提高甜菊苷和莱鲍迪苷A的浸出率；然而，该发明专利申请并没有公开如何对提取液进行进一步的分离。

公开号为CN103483402A的中国发明专利申请公开了一种甜菊苷及莱鲍迪苷A的提纯制备方法，该方法将甜叶菊依次经过醇提取、大孔树脂柱层析、硅胶柱层析和重结晶等步骤，得到了含量在98％以上的甜菊苷和莱鲍迪苷A；然而，该发明专利申请保护的方法大量使用有毒有害溶剂，且硅胶柱层析仅适合实验室少量制备。

公开号为CN104098734A的中国发明专利申请公开了一种苯硼酸基团修饰大孔树脂的制备方法及其在莱鲍迪苷A和甜菊苷分离中的应用，该树脂能对甜菊糖苷中的莱鲍迪苷A进行选择性吸附，所得莱鲍迪苷A和甜菊苷的纯度和回收率均较高；然而，该发明专利申请保护的方法制备的树脂工艺复杂，且没有量产以达到工业生产的需求。

综上所述，现有技术所公开的方法大多存在溶剂耗费量大、耗时长、工艺复杂、设备昂贵、可处理样品太少和不适合工业化生产等缺点。因此，研究开发一种对甜菊糖苷中的主成分莱鲍迪苷A和甜菊苷进行分离的方法迫在眉睫。

此外，在甜叶菊提取物中，甜菊糖苷为主要产品，而甜菊多酚是甜菊糖苷提取过程中的副产物。提取甜菊糖苷时，通常用铁盐和钙盐来络合除杂，这不仅将甜菊多酚一起并入废渣，更糟糕的是，同时也会产生较多的有机无机混杂的固体废料。

甜菊多酚包括绿原酸类、黄酮类、黄酮醇类、黄烷醇类、异黄酮类和原花青素等，目前报道的具有明确结构的甜菊多酚至少有30多种。甜菊多酚多为水溶性多酚化合物，具有良好且稳定的游离基清除能力，也具有抗炎、利尿、抗高血压、降血糖、抗肿瘤和抗氧化性能，此外，还具有降压降血脂的功效。如果能在得到高纯度的主产物莱鲍迪苷A 和甜菊苷的同时，得到高纯度甜菊多酚，那就大大提高了甜叶菊的综合利用价值。

鉴于此，特提出本发明。