[发明专利]一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于该检测方法为：首先，将冰毒和吗啡抗原分别包被在不同荧光编码磁性微球表面，形成微球-抗原复合物；将冰毒抗体和吗啡抗体分别与藻红蛋白偶联以达到标记物最大信号强度80％时的抗体浓度为实验浓度，最大信号强度在没有待测样品的情况下用偶联藻红蛋白的抗体与偶联抗原的微球滴定测得；

将优化剂量的偶联抗体和待测样品同时与荧光编码磁性微球孵育，最终形成微球-抗原-藻红蛋白偶联抗体荧光免疫复合物；经仪器检测荧光类型和荧光信号强度完成检测。

2.如权利要求1所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：形成微球-抗原复合物后，利用离心管和磁力架对荧光编码磁性微球进行洗涤和分离，去除未结合抗原。

3.如权利要求1或2所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：荧光编码磁性微球为具有羧基基团的磁性聚苯乙烯荧光编码微球。

4.如权利要求1所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：包被抗原微球是通过活化荧光微球表面的羧基基团，将羧基基团分别与冰毒抗原、吗啡抗原上的氨基形成共价键，从而形成复合物。

5.如权利要求1所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：检测抗体是指与藻红蛋白偶联的冰毒单克隆抗体和吗啡单克隆抗体。

6.如权利要求1或2或4所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：将冰毒和吗啡抗原分别包被在不同荧光编码磁性微球表面过程中包被比例和孵育条件：10μg抗原包被5×10⁶个荧光编码磁性微球，抗原与荧光编码磁性微球的孵育条件为室温避光震荡1.5h。

7.如权利要求1所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：冰毒抗原和吗啡抗原共价偶联于荧光编码磁性微球表面，利用冰毒抗原和吗啡抗原、待测样品中的冰毒分子和吗啡分子、藻红蛋白偶联的冰毒抗体和吗啡抗体，形成微球-抗原-藻红蛋白偶联抗体荧光免疫复合物，通过竞争法进行检测。

8.如权利要求1所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：经仪器检测荧光类型和荧光信号强度完成检测中以藻红蛋白作为荧光标记物，根据其荧光强度计算待测物含量。

9.如权利要求1所述的一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于：藻红蛋白偶联冰毒抗体和吗啡抗体的浓度为30μg/mL，每1mg抗体偶联藻红蛋白3.5mg。

10.一种如权利1-6所述的基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒检测的试剂盒，其特征在于包含：包括试剂盒以及放在试剂盒内的多个药剂盒，其中，具有放置不同荧光编码磁性微球的药剂盒，荧光编码微球包含有分别包被冰毒抗原和吗啡抗原的荧光编码微球；具有放置检测抗体的药剂盒，检测抗体包括分别偶联藻红蛋白的冰毒抗体和吗啡抗体，具有放置标准品溶液的药剂盒，所述标准品溶液包括冰毒标准品和吗啡标准品溶液，具有放置缓冲液的药剂盒，所述缓冲液为pH7.4的PBS缓冲液，试剂盒里设有可发性聚苯乙烯泡沫层，试剂盒包括盒体与盒盖，盒体与盒盖由酚醛塑料材质的连接轴连接，试剂盒底部预制有存放碎冰的冰槽。