[发明专利]一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法及试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于流式荧光技术同步检测吗啡和冰毒的检测方法及试剂盒，是以磁性荧光编码微球作为载体、以藻红蛋白作为荧光标记物，在一个待测样品中同时检测吗啡和冰毒的一种流式荧光免疫分析法。在本发明中，分别将冰毒抗原和吗啡抗原共价偶联于不同磁性聚苯乙烯荧光编码微球表面，同时分别将吗啡抗体、冰毒抗体与藻红蛋白共价偶联，利用竞争分析法，形成微球‑抗原‑抗体荧光免疫复合体。通过识别不同编码微球区分两种检测物，通过检测藻红蛋白荧光强度计算待测物浓度。本发明可以同时检测待测样品中冰毒和吗啡含量，效率高、特异性强、灵敏度高、重复性好，可用于缉毒筛查，具有较好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种检测方法及试剂盒，更具体一点说，涉及一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法及试剂盒，属于生物技术检测领域。

背景技术

冰毒(甲基苯丙胺)(methamphetamine)又称甲基安非他明、去氧麻黄碱、盐酸甲基苯丙胺。因其原料外观为纯白结晶体，晶莹剔透，故被吸毒、贩毒者称为“冰”。由于它的毒性剧烈，人们便称之为“冰毒”。冰毒属于兴奋剂类精神药品，具有强烈的中枢兴奋作用，由于其刺激性强、持久力强，使用一次便会上瘾，因此被称为毒品之王。

吗啡(Morphine)，为阿片受体激动剂，在鸦片中的含量为4％-21％，平均10％左右。1806年德国化学家泽尔蒂纳首次将其从鸦片中分离出来，并使用希腊梦神Morpheus的名字将其命名为吗啡。其衍生物盐酸吗啡是临床上常用的麻醉剂，有极强的镇痛作用，而且它的镇痛作用有较好的选择性，多用于创伤、手术、烧伤等引起的剧痛，也用于心肌梗死引起的心绞痛，还可作为镇痛、镇咳和止泻剂；吗啡的二乙酸酯又被称为海洛因。但其最大缺点是易成瘾。这使得长期吸食者无论从身体上还是心理上都会对吗啡产生严重的依赖性，造成严重的毒物癖，从而对自身和社会均造成极大的危害，众所周知，吗啡是海洛因在体内代谢的主要产物，吸食海洛因后可以在体液中检测到吗啡的存在。其最大缺点是易成瘾。这使得长期吸食者无论从身体上还是心理上都会对吗啡产生严重的依赖性，造成严重的毒物癖，从而对自身和社会均造成极大的危害。

毒品威胁着人类的健康，威胁着全世界的社会稳定和经济发展，是当今世界最严重的社会问题。在同一样品中，同步地、准确地、快速地检测待测样品中冰毒和海洛因的含量具有重要的意义。

流式微球技术利用球形基质作为载体,以流式细胞术作为检测平台,可以在较短时间内对样品进行大规模检测。该系统主要基于流式荧光编码微球，检测通量大、灵敏度高,可实现同步检测多靶标，具有较为广阔的应用空间。

发明内容

本发明提供了一种基于流式荧光技术的冰毒与吗啡的检测方法，利用不同荧光编码磁性微球和藻红蛋白实现在同一份样品中同步检测冰毒和吗啡。

本发明提供了一种基于流式荧光技术的冰毒与吗啡的检测的试剂盒

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明一种基于流式荧光技术的同步检测吗啡和冰毒的检测方法，其特征在于该检测方法为：首先，将冰毒和吗啡抗原分别包被在不同荧光编码磁性微球表面，形成微球-抗原复合物；

将冰毒抗体和吗啡抗体分别与藻红蛋白偶联，并对抗体的使用量进行优化，确定适合的抗体使用剂量，避免检测抗体过量；

将优化剂量的偶联抗体和待测样品同时与荧光编码磁性微球孵育，最终形成微球-抗原-藻红蛋白偶联抗体荧光免疫复合物；

经仪器检测荧光类型和荧光信号强度完成检测。

优选的，形成微球-抗原复合物后，利用离心管和磁力架对荧光编码磁性微球进行洗涤和分离，去除未结合抗原。

优选的，荧光编码磁性微球为具有羧基基团的磁性聚苯乙烯荧光编码微球。