[发明专利]一种枸杞酸含量的电化学检测方法

说明书

本发明枸杞酸含量的电化学检测方法：一、将醋酸加入到壳聚糖中，超声形成壳聚糖溶液；二、将铅离子溶液加入壳聚糖溶液中，超声均匀；三、将枸杞酸加入步骤二溶液中，超声均匀；四、往步骤三溶液中滴加氢氧化钠溶液，超声至形成凝胶状；五、预处理金电极；六、步骤四凝胶滴于步骤五金电极表面，晾干；七、将步骤六金电极和铂丝电极、Ag/AgCl电极浸入含有氯化钾的铁氰化钾和亚铁氰化钾溶液的混合液中测定阻抗谱；八、利用电化学阻抗值和枸杞酸浓度绘制标准曲线；九、将碾碎的枸杞或枸杞提取物加入乙醇中，超声分散后过有机系微孔滤膜，加入步骤二的溶液中，超声均匀；重复步骤四到七，测得阻抗值；将阻抗值带入步骤八的标准曲线，计算得到枸杞酸含量。

技术领域

本发明属于检测技术领域，涉及一种可以快速测定样品中枸杞酸含量的分析方法，具体是一种枸杞酸含量的电化学分析法，以检测植物样品中枸杞酸的含量。

背景技术

2004年，日本学者Toyoda-Ono等从宁夏枸杞和北方枸杞的干果中分离纯化得到枸杞酸。枸杞酸是目前从天然资源中发现唯一的一种新型、稳定、纯天然L-抗坏血酸前体物质。研究表明，枸杞酸的抗氧化能力相比较抗坏血酸更持久，能长时间存在于体内发挥抗氧化活性，具有更高效地清除自由基能力，且能明显抑制癌细胞增值，能有效抑制黑色素的生成。

在中国，枸杞原料的产地来源多，但质量存在较大差异。目前，药典中以多糖和甜菜碱作为枸杞品质指标。然而，一方面目前枸杞中多糖的检测较为繁琐，专属性不强，误差大；另一方面，甜菜碱的合成价格便宜，且甜菜根中含有大量甜菜碱，专属性较差，不能很好的评价枸杞子品质。枸杞酸在枸杞子中含量丰富，且枸杞酸仅存在枸杞子中，其含量高低是枸杞子品质的最直接反映，因此枸杞酸可以为枸杞的品质提供新的标准。目前，采用高效液相色谱(HPLC)方法检测枸杞或枸杞提取物中枸杞酸的含量(例如中国专利文献CN103323551A)。但采用HPLC方法，其步骤复杂，操作繁琐。因此，亟需开发一种快速检测枸杞酸含量的方法，具有积极意义。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种枸杞酸含量的电化学检测方法。

本发明采用电化学分析的方法检测枸杞或枸杞提取物中枸杞酸的含量，具体技术方案如下：

一种枸杞酸含量的电化学检测方法，其按如下步骤进行：

标准曲线的测定：

步骤一、将一定量的醋酸加入到壳聚糖中，超声形成一定浓度的壳聚糖溶液；

步骤二、将一定浓度的铅离子溶液加入步骤一的壳聚糖溶液中，超声均匀；

步骤三、将一定量的枸杞酸加入步骤二的溶液中，超声均匀；

步骤四、往步骤三的溶液中缓慢滴加氢氧化钠溶液，一边滴加一边超声，直到溶液开始交联，形成凝胶状；

步骤五、对金电极进行预先处理：将金电极进行抛光、冲洗、干燥，然后置于H₂SO₄溶液中采用循环伏安法进行处理；其中，所述的抛光优选采用适当直径的Al₂O₃粉末在麂皮上抛光打磨；所述的冲洗优选先采用超纯水冲洗干净，再分别用乙醇、超纯水超声清洗；所述的干燥优选采用氮气干燥；

步骤六、取一定量步骤四中的凝胶滴加在步骤五中处理好的金电极表面，自然晾干；

步骤七、将步骤六修饰后的金电极和一根铂丝电极以及一根Ag/AgCl(3M KCl)电极一起浸入含有氯化钾的铁氰化钾和亚铁氰化钾溶液的混合溶液中(即铁氰化钾和亚铁氰化钾溶液的混合溶液加入氯化钾)进行阻抗谱测定；所得阻抗的数值受到枸杞酸含量的变化而变化，枸杞酸含量多时，枸杞酸分子在凝胶中占据了较多的空位，导致空间位阻增加，进而增加阻抗数值；

步骤八、利用测得的电化学阻抗值和枸杞酸浓度(第三步骤加入的枸杞酸是已知浓度的枸杞酸)做标准曲线；