[发明专利]一种二倍体香蕉花粉活力的检测方法

权利要求书

1.一种二倍体香蕉花粉活力的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）收集花粉：采集成熟花蕾，取花药，经卡诺氏固定液固定后，取花粉；

（2）制备醋酸洋红络合染色液：按用量比为（90~110）mL：（0.5~1.5）g，在质量浓度40~50%醋酸溶液中加入洋红，搅拌，得混合溶液，将混合溶液煮沸1.5~2.5 h，煮沸期间定时加水维持混合溶液体积，煮沸冷却后，以混合溶液计，按体积比为1：0.2~0.4，加入纳米铁络合物，以500~600 r/min速率搅拌20~30 min，过滤，得醋酸洋红络合染色液；

所述纳米铁络合物为由按用量比为（100~120）mL：（2~3）g，在乙胺溶液中加入纳米铁，800~1000 W超声4~6 h而得；

（3）检测花粉活力：取步骤（1）所得花粉，浸染处理后，置于载玻片上，滴加1~3滴醋酸洋红络合染色液，染色5-10 min后镜检；

所述浸染处理为：在花粉中加入pH值4.8~5.4、0.2M的乙酸-乙酸钠缓冲液，25~28℃浸染5~8 min后，取出花粉，加入质量浓度20~30%氯化铁溶液，再次浸染5~8 min，取出花粉，吸干水分后置于载玻片上；所述花粉、乙酸-乙酸钠缓冲液和氯化铁溶液的用量比为（5~8）g：（30~40）mL：（30~40）mL。

2.根据权利要求1所述的一种二倍体香蕉花粉活力的检测方法，其特征在于，步骤（1）中，所述卡诺氏固定液为由体积比为3：1~2的无水乙醇溶液和冰醋酸配制而成；所述经卡诺氏固定液固定的时间为8~16 h。

3.根据权利要求1所述的一种二倍体香蕉花粉活力的检测方法，其特征在于，所述乙胺溶液的质量浓度为15~18 %。

4.根据权利要求1的所述一种二倍体香蕉花粉活力的检测方法，其特征在于，纳米铁络合物为由按用量比为110 mL：2.5 g，在乙胺溶液中加入纳米铁，900 W超声5 h而得。

5.根据权利要求1的所述一种二倍体香蕉花粉活力的检测方法，其特征在于，步骤（2）中，混合溶液和纳米铁络合物的体积比为1：0.3。